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[求助]
双向电泳:为什么我的2D胶银染后显色不到1分钟就过染色了?急求!!!
我的银染步骤如下:
固定2h: 50%乙醇,10%乙酸 40%超纯水
敏化30min: 30%乙醇,0.2%硫代硫酸钠,6.8%无水乙酸钠 0.125%戊二醛
漂洗5min×3次: 超纯水
银染10min: 0.1%硝酸银,0.02%甲醛
漂洗40秒×2次: 超纯水
显色:2.5%碳酸钠,0.01%甲醛
终止:1%乙酸 10min
在显色步骤我的操作是:不到一分钟(约55秒)就倒掉显色液,然后立马加入终止液,结果显色结果许多蛋白点出现空穴,请问这是否为过染色现象?染过的原因是什么呢?
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银染.jpg |
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