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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 有关HPLC分离实验的问题，求大神赐教
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要考研的猪

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关HPLC分离实验的问题，求大神赐教 已有2人参与

用反相HPLC   C18 4.6x150nm  粒度3.5um  流动相  甲醇和水 流速1ml/min   进样量20ul 室温
得到的图如下，怎样改进实验方法来分离出较纯的单一物质

有关HPLC分离实验的问题，求大神赐教
截图20150916155128.png
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1楼 2015-09-16 15:59:17
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个东西不单纯，组份很多，亲水性这么强，估计反相分离没什么戏，考虑HILIC柱或毛细管电泳试试。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
7楼2015-09-17 17:05:49
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普通回帖

佑安_90

金虫 (小有名气)
你得说大概有几种物质以及他们的性质吧，这样什么信息也没有，实在不好下结论啊

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trywhatyoucandoandbelieveinyouself
2楼2015-09-16 23:59:59
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xmin828

金虫 (正式写手)
1%？2%？是什么？我也没看到峰。。。
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3楼2015-09-17 09:05:55
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要考研的猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 佑安_90 at 2015-09-16 23:59:59
你得说大概有几种物质以及他们的性质吧，这样什么信息也没有，实在不好下结论啊

分析色素的成分，现在只知道成分很复杂，水溶性很强，具体几种组分未知，实验用30%乙醇粗提出色素，烘干后用去离子水溶解   在C18层析柱上用5%甲醇水溶液淋洗，得到初分产物，再在C18层析柱上分别用 纯水 1%和2%的甲醇水溶液淋洗，再用HPLC检测的出来的图谱
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4楼2015-09-17 14:24:37
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要考研的猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xmin828 at 2015-09-17 09:05:55
1%？2%？是什么？我也没看到峰。。。

1%和2%的甲醇水溶液，峰形不明显，但是还是可以看到有小的峰
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5楼2015-09-17 14:25:56
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xmin828

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
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5楼: Originally posted by 要考研的猪 at 2015-09-17 14:25:56
1%和2%的甲醇水溶液，峰形不明显，但是还是可以看到有小的峰...

C18柱除非说明书特别标明，不能使用有机相比例这么低的流动相。我看你说分析水溶性很强的物质，那么就不应该使用C18柱这种反相系统的色谱柱，不过因为你这个提取过程估计会引入水，是否可以考虑看看使用HILIC柱？
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6楼2015-09-17 16:10:09
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要考研的猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xmin828 at 2015-09-17 16:10:09
C18柱除非说明书特别标明，不能使用有机相比例这么低的流动相。我看你说分析水溶性很强的物质，那么就不应该使用C18柱这种反相系统的色谱柱，不过因为你这个提取过程估计会引入水，是否可以考虑看看使用HILIC柱？...

谢谢
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8楼2015-09-17 19:37:05
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要考研的猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kf1009 at 2015-09-17 17:05:49
你这个东西不单纯，组份很多，亲水性这么强，估计反相分离没什么戏，考虑HILIC柱或毛细管电泳试试。

万分感谢
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9楼2015-09-17 19:37:27
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要考研的猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kf1009 at 2015-09-17 17:05:49
你这个东西不单纯，组份很多，亲水性这么强，估计反相分离没什么戏，考虑HILIC柱或毛细管电泳试试。

请问一下，如果用高速逆流色谱能不能得到有效分离呢？
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10楼2015-09-21 10:01:09
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