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罗淑芬

新虫 (小有名气)

[求助] 关于己糖激酶和果糖激酶的测定

最近在测己糖激酶和果糖激酶,请问有哪位测定过,能不能提供下反应液,原理?样品我经过提取、透析后,采用了以下方法测定:
以生成的NADH量计算酶活
果糖激酶反应液为:50mM Tris-HCl pH8.0 含4mM MgCl2,2.5mM ATP,0.33μM NAD+,1 U葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,1mM 葡萄糖,25μL脱盐的提取液,340nm比色,每5分钟记录一次吸光值。
己糖激酶反应液:50mM Tris-HCl pH8.0 含4mM MgCl2,2.5mM ATP,0.33μM NAD+,1 U葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,1U 磷酸葡萄糖异构酶、0.4mM 果糖,25μL脱盐的提取液。


不知上述反应液是否合理?求指教
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injurehou

银虫 (初入文坛)

每五分钟测一回?总共测几次啊?

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-04-12 19:15:43
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