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Con8-

新虫 (初入文坛)

[交流] 硫酸苯酚-紫外分光光度 已有4人参与

【含量测定】 对照品溶液的制备  取无水葡萄糖对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含无水葡萄糖0.6mg的溶液,即得。
标准曲线的制备  精密量取对照品溶液1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml,分别置50ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。精密量取上述各溶液2ml,置具塞试管中,分别加4%苯酚溶液1ml,混匀,迅速加入硫酸7.0ml,摇匀,于40℃水浴中保温30分钟,取出,置冰水浴中5分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ A),在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法  取本品粗粉约1g,精密称定,置圆底烧瓶中,加水100ml,加热回流1小时,用脱脂棉滤过,如上重复提取1次,两次滤液合并,浓缩至适量,转移至100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取2ml,加乙醇10ml,搅拌,【离心】,取沉淀加水溶解,置50ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀。精密量取2ml.照标准曲线的制备项下的方法,自“加4%苯酚溶液1ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的重量(mg),计算,即得。
本品按干燥品计算,含玉竹多糖以葡萄糖(C6H12O6)计,不得少于6.0%。

用此方法测苦荞麦中的【多糖】,其中离心那一步离心时间和转速对最终的结果有影响么?比如说离心5min,离心25min。

原理是多糖不溶于高浓度乙醇而其他单糖等溶,糖(单糖和多糖等)在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比。
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BSHT1994

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主,这种方法测出的糖含量最低可以达到多少啊?

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-12-17 22:51:49
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longyi706565

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这是你自己做的标准还是法定标准?
一般来说,标准里面有离心操作,都要写转速和时间,转速太低,时间不够很可能直接关系结果,这些都是需要进行验证的。
2楼2015-09-16 11:03:57
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aisnaisn

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转速和时间可以大一点,久一点,这样提取效果会好一些
3楼2015-09-18 09:13:13
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5楼2017-02-22 16:13:56
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