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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于酶纯化 已有2人参与

第一次做酶纯化,完全无法上手啊。因为研究生属于转专业,所以特来求助。上学期表达了一半纤维素酶,分子量大概31kDa,等电点4.5,。想用凝胶层析法来做酶纯化,但对需要用的填充物以及洗脱液完全不懂,有没有大神能指导一下?
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
2楼2015-09-16 09:28:20
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议用DEAE高流速琼脂糖凝胶,进行阴离子交换层析。加QQ514099167,交流啊
3楼2015-09-16 09:34:43
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-16 09:34:43
建议用DEAE高流速琼脂糖凝胶,进行阴离子交换层析。加QQ514099167,交流啊

好的 我加你了
4楼2015-09-16 15:02:34
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-09-16 09:28:20
先找些重组蛋白纯化的资料看吧:http://www.detaibio.com/topics/gel-filtration-chromatography.html...

好的 谢谢
5楼2015-09-16 15:03:47
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永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)

这位虫友:
       这个是可以的,但是要注意填料的选择以及ph等环境的设置调整。优化产生一个最优的层析条件,进行纯化。
6楼2015-09-17 16:41:17
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

既然是重组表达的蛋白质,没加标签吗?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2015-09-19 17:31:41
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2015-09-19 17:31:41
既然是重组表达的蛋白质,没加标签吗?

木有加标签,因为第一次做生物方向,没有经验。
8楼2015-10-16 09:59:12
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
8楼: Originally posted by 果子Amanda at 2015-10-16 09:59:12
木有加标签,因为第一次做生物方向,没有经验。...

重新加上标签,不然如果你纯化得太慢了就耗时更久了。都一个月过去了,要是真的要加,那现在加上标签的蛋白质早就拿到了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2015-10-16 11:28:05
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