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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 关于酶纯化
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于酶纯化 已有2人参与

第一次做酶纯化，完全无法上手啊。因为研究生属于转专业，所以特来求助。上学期表达了一半纤维素酶，分子量大概31kDa，等电点4.5，。想用凝胶层析法来做酶纯化，但对需要用的填充物以及洗脱液完全不懂，有没有大神能指导一下？
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1楼 2015-09-15 17:45:00
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先找些重组蛋白纯化的资料看吧：http://www.detaibio.com/topics/gel-filtration-chromatography.html
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
2楼2015-09-16 09:28:20
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议用DEAE高流速琼脂糖凝胶，进行阴离子交换层析。加QQ514099167，交流啊
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3楼2015-09-16 09:34:43
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-16 09:34:43
建议用DEAE高流速琼脂糖凝胶，进行阴离子交换层析。加QQ514099167，交流啊

好的 我加你了
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4楼2015-09-16 15:02:34
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-09-16 09:28:20
先找些重组蛋白纯化的资料看吧：http://www.detaibio.com/topics/gel-filtration-chromatography.html...

好的 谢谢
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5楼2015-09-16 15:03:47
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永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)
这位虫友：
       这个是可以的，但是要注意填料的选择以及ph等环境的设置调整。优化产生一个最优的层析条件，进行纯化。
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6楼2015-09-17 16:41:17
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
既然是重组表达的蛋白质，没加标签吗？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2015-09-19 17:31:41
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果子Amanda

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2015-09-19 17:31:41
既然是重组表达的蛋白质，没加标签吗？

木有加标签，因为第一次做生物方向，没有经验。
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8楼2015-10-16 09:59:12
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
8楼: Originally posted by 果子Amanda at 2015-10-16 09:59:12
木有加标签，因为第一次做生物方向，没有经验。...

重新加上标签，不然如果你纯化得太慢了就耗时更久了。都一个月过去了，要是真的要加，那现在加上标签的蛋白质早就拿到了。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2015-10-16 11:28:05
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