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求助如何突变某一coding sequence碱基序列,可以达到让该蛋白无法成功表达的方法
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ziecoe
铜虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 86
帖子: 51
在线: 21.3小时
虫号: 802028
注册: 2009-07-01
专业: 炎症、感染与免疫
[
求助
]
求助如何突变某一coding sequence碱基序列,可以达到让该蛋白无法成功表达的方法
已有2人参与
现在想通过Crispr-Cas9的在sgRNA处剪切,并会出现随机突变,插入,缺失的性质。使HepG2细胞内某一蛋白无法表达,或者说western检测不到。那么对编码序列某一碱基区域的破坏该如何选择?该把sgRNA设计到那些氨基酸对应的碱基呢?有没有什么规律?
求教了。感谢大家。
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1楼
2015-09-14 19:57:22
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liuderong
铁杆木虫
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在线: 142.1小时
虫号: 1882145
注册: 2012-07-07
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
在编码区前面部分随便插入或缺失一个碱基,整个开放阅读框就移码了,无法翻译,或者翻译成其他蛋白。
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2楼
2015-09-16 11:17:49
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huangrui1988
铜虫
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虫号: 953497
注册: 2010-02-07
专业: 微生物资源与分类学
【答案】应助回帖
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
你把ATG突变掉,肯定不翻译,哈哈。
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3楼
2015-09-16 11:21:29
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