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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么每次qPCR结果都不一样
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yangzhx

铜虫 (初入文坛)

[交流] 为什么每次qPCR结果都不一样 已有3人参与

扩增效率都在90-110，溶解曲线也有单一峰，每次3个重复标准差也小于0.2，为什么就是得不到一致的结果呢，头疼啊
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1楼 2015-09-14 17:54:28
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勤奋的工人

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
都是这样的呀…所以说定量很不准

发自小木虫Android客户端
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2楼2015-09-14 20:26:19
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邪灵起归-

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 勤奋的工人 at 2015-09-14 20:26:19
都是这样的呀…所以说定量很不准

那根据什么判断结果是准确的啊？
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3楼2018-06-14 13:04:58
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cventbio

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这问题你描述的不够准确。我希望你能表达清楚问题。
当然你说的情况我们遇到多次。

我给你几个方向
1，引物批次一样? 引物溶度对吗？ 你验证过引物吗？
2，溶解曲线标漂亮证明你引物设计的漂亮，但是你如何验证你的mix也是对的呢？
3，模板的问题如果排查，你有方法？
赞一下 回复此楼
www.cventbio.com 荧光定量、无缝链接、单克隆......
4楼2018-06-15 14:51:17
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