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richujs

木虫 (正式写手)

[交流] 请问50%的PEG如何调pH

在做细胞融合的时候需要用到50%PEG,查资料看到:

精确称量1.ogPEG4000装入耐高温高压密封的玻璃小瓶中,冷却后放入4℃冰箱。融合前,取出后用预温于37℃水浴中的无血清RPMI一1640培养液1ml溶解,即为所需的50%PEG000,轻微加温(<6o℃)使其充分溶解,调节PH值为7.5~7.8之间,待用。


请问一下PEG灭菌溶解后,怎么调pH,用试纸吗?pH计测得话,还要搬进超净台灭菌?

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:18 ]
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思想是能力和力量的源泉
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fruit

木虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
你先配一点儿,在非无菌条件下测定一下,获得经验值后,在无菌条件下直接加那么多就行了。
2楼2008-08-28 18:18:08
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fkbp23

木虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
PEG压后会被氧化变黄,建议不要高温高压灭菌,你可以先配些PEG溶液,测一下pH,然后用一定pH值的某种缓冲液滴定到所需pH,记录加入的缓冲液的量,下次配时直接加入此体积的缓冲液即可。50%的PEG粘度很大,调pH值不容易。因为平衡时间很长,要等很久读数才稳定。
3楼2008-08-28 18:18:58
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richujs

木虫 (正式写手)

谢谢fruit , fkbp23  。
我要做的是杂交瘤细胞,必须灭菌。
看到几篇论文里都写着调pH,不知道他们怎么调的。
思想是能力和力量的源泉
4楼2008-08-28 19:21:24
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

hehe


xyklmu(金币+1,VIP+0):积极交流
估计分子克隆或者精编上有,
做融合应该是特殊的碱.个人猜测很有可能是KOH,你需要再查文献求证一下。
祝好运。
5楼2008-08-31 02:39:27
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richujs

木虫 (正式写手)

谢谢。看到的有NaOH和NaHCO3的,也有不调的
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6楼2008-08-31 13:06:05
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anthappy

木虫 (著名写手)

我也做过融合,不需要调pH的
7楼2008-09-01 14:23:32
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richujs

木虫 (正式写手)

今天去别的学院去看看了,明天我我师姐在哪边做融合,要准备盐酸过滤除菌调pH的。
思想是能力和力量的源泉
8楼2008-09-01 22:47:59
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richujs

木虫 (正式写手)

他们好像用pH试纸
思想是能力和力量的源泉
9楼2008-09-01 22:48:24
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