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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问50%的PEG如何调pH
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richujs

木虫 (正式写手)

[交流] 请问50%的PEG如何调pH

在做细胞融合的时候需要用到50%PEG，查资料看到：

精确称量1.ogPEG4000装入耐高温高压密封的玻璃小瓶中，冷却后放入4℃冰箱。融合前，取出后用预温于37℃水浴中的无血清RPMI一1640培养液1ml溶解，即为所需的50%PEG000，轻微加温(<6o℃)使其充分溶解，调节PH值为7.5~7.8之间，待用。


请问一下PEG灭菌溶解后，怎么调pH，用试纸吗？pH计测得话，还要搬进超净台灭菌？

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:18 ]
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1楼 2008-08-28 15:32:28
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fruit

木虫 (小有名气)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
你先配一点儿，在非无菌条件下测定一下，获得经验值后，在无菌条件下直接加那么多就行了。
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2楼2008-08-28 18:18:08
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fkbp23

木虫 (小有名气)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
PEG压后会被氧化变黄，建议不要高温高压灭菌，你可以先配些PEG溶液，测一下pH，然后用一定pH值的某种缓冲液滴定到所需pH，记录加入的缓冲液的量，下次配时直接加入此体积的缓冲液即可。50%的PEG粘度很大，调pH值不容易。因为平衡时间很长，要等很久读数才稳定。
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3楼2008-08-28 18:18:58
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richujs

木虫 (正式写手)
谢谢fruit ， fkbp23  。
我要做的是杂交瘤细胞，必须灭菌。
看到几篇论文里都写着调pH，不知道他们怎么调的。
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思想是能力和力量的源泉
4楼2008-08-28 19:21:24
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

hehe

★
xyklmu(金币+1,VIP+0):积极交流
估计分子克隆或者精编上有,
做融合应该是特殊的碱.个人猜测很有可能是KOH，你需要再查文献求证一下。
祝好运。
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5楼2008-08-31 02:39:27
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richujs

木虫 (正式写手)
谢谢。看到的有NaOH和NaHCO3的，也有不调的
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思想是能力和力量的源泉
6楼2008-08-31 13:06:05
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anthappy

木虫 (著名写手)
我也做过融合，不需要调pH的
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7楼2008-09-01 14:23:32
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richujs

木虫 (正式写手)
今天去别的学院去看看了，明天我我师姐在哪边做融合，要准备盐酸过滤除菌调pH的。
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思想是能力和力量的源泉
8楼2008-09-01 22:47:59
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richujs

木虫 (正式写手)
他们好像用pH试纸
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9楼2008-09-01 22:48:24
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