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胡彦君

新虫 (小有名气)

[求助] 求教液相高手~~怎么把这两个峰分开 已有3人参与

求教液相高手怎么把下边图片里的两个连在一起的峰给分开,后一张图片是我的流动相比例。谢谢

求教液相高手~~怎么把这两个峰分开


求教液相高手~~怎么把这两个峰分开-1


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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你这张图,有可能是两个峰没分开,也有可能是烈峰。裂峰的原因:柱子坏了,柱子太脏,或者柱后管路太长等等。先考虑以上方法能否解决。
如果确认是两个分不开东西,你可以考虑:1.从你的流动相来看,流动相极性已经够大了,不可能再调大,所以建议换柱子,如果是C18柱,就换成C8或者C4柱,使用25cm柱子,效果应该会更好些。
2.如果没有柱子可换,看看分离你化合物PKA值,如果两个化合物PKA差值在2以上,可考虑调节流动相的pH值实现分离,如加三氟乙酸、磷酸或者醋酸,还可以使用缓冲液。
3.如果你的成分具有带正电的基团,比如氨基什么的,可以考虑使用表明活性剂,如SDS,辛烷磺酸钠等等
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
6楼2015-09-14 08:56:24
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卓越_先锋

荣誉版主 (职业作家)

糊涂虫

优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by 胡彦君 at 2015-09-13 13:46:18
A是水,C是乙腈。请问是这个样子吗?!

...

嗯,暂且这样先试试。11~20min这段时间如果第二个峰出不来就把5%稍微往上调一点,如果分离度还不是很好就在5%基础上往下调一点

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追求卓越,敢为先锋
5楼2015-09-13 13:52:16
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hr.wu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 胡彦君 at 2015-09-14 13:14:27
我的样品是板蓝根的主要指标成分的标准品,分不开的两个峰是腺苷和告依春,同样的东西,同样的条件(就是我上图的条件),有时候有分开了有时候又分不开,我也不知道怎么回事。而且看到跑出来的峰有点拖尾,所以我今 ...

梯度洗脱时在中后段出现基线漂移常有出现,不用在意。
8楼2015-09-14 13:18:13
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普通回帖

卓越_先锋

荣誉版主 (职业作家)

糊涂虫

优秀版主

要想分开后面两个峰,建议在第二个峰出来之前用等度。改下梯度,即11min时改成5%乙腈(C是乙腈吧)一直到第三个峰出来,暂且假设第三个峰出来的时间是20min,那么你的梯度就设成0~10min时2%的C,11min时改成5%min的C,20min(具体时间视第三个峰的tR而定)也是5%min的C,21min后就按照你之前设定的梯度去走了
追求卓越,敢为先锋
2楼2015-09-13 13:18:14
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胡彦君

新虫 (小有名气)

3楼2015-09-13 13:42:57
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胡彦君

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 卓越_先锋 at 2015-09-13 13:18:14
要想分开后面两个峰,建议在第二个峰出来之前用等度。改下梯度,即11min时改成5%乙腈(C是乙腈吧)一直到第三个峰出来,暂且假设第三个峰出来的时间是20min,那么你的梯度就设成0~10min时2%的C,11min时改成5%min的 ...

A是水,C是乙腈。请问是这个样子吗?!
求教液相高手~~怎么把这两个峰分开-2



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4楼2015-09-13 13:46:18
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胡彦君

新虫 (小有名气)

送红花一朵
我的样品是板蓝根的主要指标成分的标准品,分不开的两个峰是腺苷和告依春,同样的东西,同样的条件(就是我上图的条件),有时候有分开了有时候又分不开,我也不知道怎么回事。而且看到跑出来的峰有点拖尾,所以我今天把水换成了0.1%的醋酸水,看看拖尾会不会好点~~还有个问题想求教你,我的板蓝根提取液跑出来的峰为什么中间有一段基线漂移了?!才开始接触液相遇到了好多问题,请教了!谢谢~~
求教液相高手~~怎么把这两个峰分开-3



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7楼2015-09-14 13:14:27
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胡彦君

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 卓越_先锋 at 2015-09-13 13:52:16
嗯,暂且这样先试试。11~20min这段时间如果第二个峰出不来就把5%稍微往上调一点,如果分离度还不是很好就在5%基础上往下调一点...

谢谢~~我使用原条件有时候又分开了,有时又分不开,加上有点拖尾,我把水换成了0.1%的醋酸水。而且我的样品板蓝根提取液在跑出来的峰中间有一段基线不稳,想问下怎么处理啊,谢谢了(C是乙腈,D是0.1%醋酸水)
求教液相高手~~怎么把这两个峰分开-4


求教液相高手~~怎么把这两个峰分开-5



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9楼2015-09-14 13:21:04
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胡彦君

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by hr.wu at 2015-09-14 13:18:13
梯度洗脱时在中后段出现基线漂移常有出现,不用在意。...

就是感觉有点丑

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10楼2015-09-14 13:22:53
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