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126keven

铁虫 (小有名气)

[求助] 细胞解冻后染菌 已有1人参与

养的细胞不容易活,后来养的癌细胞,长的挺好,7月30号冷冻起来,解冻后24小时第一次换液,没发现染菌,也可能是菌比较少,第二次在48小时换液,发现溶液变浑浊很明显。细胞培养液在培养箱里放了3天,没发现染菌,想问下大家认为的原因,谢谢大家了
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郭冠霖

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
126keven: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-13 10:29:05
1冻存的时候或者冻存前已经污染但是并不严重。2解冻时复苏的时候没有给冻存管完全消毒。毕竟你要快速复苏会慌乱。3最不可能的情况。就是pbs。或者枪头。或者复苏后传代的时候污染。建议把细胞扔了。然后空陪培养基。和PBS或者冻存液。也空陪看看。如果有同时期的冻存细胞。复苏一管看情况。

发自小木虫Android客户端
2楼2015-09-13 08:44:53
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126keven

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 郭冠霖 at 2015-09-13 08:44:53
1冻存的时候或者冻存前已经污染但是并不严重。2解冻时复苏的时候没有给冻存管完全消毒。毕竟你要快速复苏会慌乱。3最不可能的情况。就是pbs。或者枪头。或者复苏后传代的时候污染。建议把细胞扔了。然后空陪培养基。 ...

想问下2,解冻时复苏的时候您一般怎么消毒,我就是在放进超净台的时候喷了下酒精
3楼2015-09-13 10:32:09
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liumaomao

新虫 (初入文坛)

复苏后可以将上清留下来培养,若冻存管中的上清也染菌,可以基本上推断是复苏前染菌,然后在进行分析。
4楼2015-10-19 15:56:31
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