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o隐形人o

新虫 (初入文坛)

[求助] 霉菌保藏 已有2人参与

前段时间从中科院微生物所订购了一株菌,当时给我的是斜面培养的试管,现在面临问题是如何长期保藏,求大神指导一下。目前已经培养了一部分并用20%甘油保藏在-20°,但不知道这种方法对不对。
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半夏star

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
o隐形人o: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-27 20:25:57
菌株在沙氏液体培养基中复苏 然后沙氏葡萄糖琼脂斜面划线,直到产生大量黑色的孢子后, 用含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液3~5ml洗脱孢子,你可多划几个斜面 多洗脱一些孢子悬液,然后加等体积的40%稀甘油和孢子悬液混合,这样 孢子悬液就等于含20%的稀甘油了,然后分装到冻存管里面,放到-20到-80℃的冰柜里面低温保存,我们实验室保存时间定为2年,但是觉得可以用不止两年
4楼2015-12-13 17:40:02
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dahuaidang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有各种方法,我们采用的是在平板上长到有孢子,然后连同有菌丝的琼脂培养基一起切成小块,泡到50%的甘油中,大约菌:甘油=2:1, -80保存。可以保存数年。
发文章发文章,没文章没法混呀。
2楼2015-09-11 16:17:52
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o隐形人o

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dahuaidang at 2015-09-11 16:17:52
有各种方法,我们采用的是在平板上长到有孢子,然后连同有菌丝的琼脂培养基一起切成小块,泡到50%的甘油中,大约菌:甘油=2:1, -80保存。可以保存数年。

我用的新月弯孢霉在PDA平板上就是部长孢子。。你们一般是如何做的?
3楼2015-12-11 10:20:20
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