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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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yangtzelv

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.柱子没啥区别,提取质粒的,纯化的,胶回收的都一样,基本都是代加工之后加上自己的商标。我一向混着用的,效果一样。可以买层析柱,自己配各种试剂,效果不比公司买的,尤其是对于大批量质粒抽提实验,买大的层析柱,省时省力。
2. 先放-20摄氏度冰箱,试剂盒来了再做实验,完全没问题。酶切体系在-20℃条件下不会有活性的。大胆做。你想想,你酶切纯化好的片段放哪里了?哪有那么容易降解?你放几个月不反复冻融,不室温长时间放置,不会有问题的。
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11楼2015-09-10 16:04:12
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yangtzelv

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by evangelina at 2015-09-09 21:31:48
当然可以,如果担心,你可以先热灭活内切酶再放-20度
柱子都是通用的,甚至做质粒的柱子也可以用来胶回收

正解
12楼2015-09-10 16:04:46
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yangtzelv

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2015-09-10 09:20:53
不同公司的柱子是不可以混用的,因为有可能出现柱子堵塞等等。酶切后最好立即做回收,因为有可能造成碱基丢失。

不要误导新手呀,这几个纯化的层析原理和层析材料是一样的。
13楼2015-09-10 16:06:11
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evangelina

无虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-10 13:18:44
跑胶分离之后,哪里来的“内切酶”?...

专家,麻烦你多花点时间读读楼主的问题
“由于买的胶回收盒子还没到,所以酶切过夜的产物可以先冻起来再跑电泳胶回收吗?”

他是酶切过的产物要过夜,再跑胶回收
14楼2015-09-10 16:06:44
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-11 23:02:31
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8楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2015-09-10 14:13:47
大哥,你做过吗?
人家试剂公司精华在柱子那,你要是随随便便都可以用,那试剂公司怎么拉拢客户啊,都干毛线用的啊?还有那试剂盒里面的溶液有的也不一样好吧
第二,酶切过的东西你的酶切位点都暴露在外边了,时 ...

试剂公司的精华在于很多人过于依赖现成的试剂盒,以前的前辈们连提DNA的苯酚都是从粉末自己配制的。试剂公司的推销很多都是高中毕业的,我们作为有独立思考能力的科研人员,不应该被他们随便拉拢。你们说的什么暴露了的酶切位点我不懂,反正酶切过胶回收后的DNA我放过三年照样管用。
15楼2015-09-10 16:11:41
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evangelina

无虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by yangtzelv at 2015-09-10 16:04:12
1.柱子没啥区别,提取质粒的,纯化的,胶回收的都一样,基本都是代加工之后加上自己的商标。我一向混着用的,效果一样。可以买层析柱,自己配各种试剂,效果不比公司买的,尤其是对于大批量质粒抽提实验,买大的层析 ...

这才像有经验的人会说的话
16楼2015-09-10 16:13:53
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yangtzelv

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by evangelina at 2015-09-10 16:13:53
这才像有经验的人会说的话...

客气了
17楼2015-09-10 16:15:35
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

可以冻起来,问题不大,柱子可以通用,回收的方法都差不多。

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18楼2015-09-11 08:01:53
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running113

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
4度放,会降解,但问题不大。

发自小木虫Android客户端
SCI我来了!!!
19楼2015-09-11 08:04:43
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

20楼2015-09-11 08:14:40
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