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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒测序
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郭帅411422

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒测序 已有5人参与

质粒PCR有条带 很亮
但是 测序 公司说 样品经过电泳检测 浓度太低，不能进行正常测序
但是 同学说 即使这样也可以测序，就是不一定 有结果
公司测序 之后（我让他们测序的）测序 失败

我的样品 之前 也是 一样操作的 可以 为啥这次就这样啊

想问 浓度太低的原因？  我需要注意的事项？
谢谢
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1楼 2015-09-09 18:19:59
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fengerwin1

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-10 23:06:37
质粒浓度太低（小于30ng/ul)测序看运气，如果载体不是低拷贝那应该是养菌时间不合适吧，试剂盒提质粒问题不大。以后如果质粒浓度低仍想测序可以尝试用载体通用引物PCR扩增后回收用你的引物测序

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2楼2015-09-09 19:15:58
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yangxp2006

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-10 23:06:52
点样多少微升？有没有和marker比较。实在不行可以测定下质粒的浓度。这些都没问题的话就是测序公司问题了，可考虑换家测测

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-09-09 23:17:34
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酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-11-01 18:02:07
菌液可以直接给测序公司测。他们小题后测序

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4楼2015-09-10 07:43:09
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-11-01 18:02:14
送菌液直接测序就行,你为什么要抽质粒?

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5楼2015-09-10 08:06:41
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郭帅411422

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bright8 at 2015-09-10 08:06:41
送菌液直接测序就行,你为什么要抽质粒?

今天才知道 做质粒 在送去测序和 送菌液测序
价格一样。。。。。。
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6楼2015-09-10 19:16:35
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-11-01 18:02:26
嗯送公司,公司也要抽质粒,然后再测序吧！

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7楼2015-09-10 19:17:47
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145457367

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 酒家何处 at 2015-09-10 07:43:09
菌液可以直接给测序公司测。他们小题后测序

我菌液pcr有目的条带，之后用双酶切检验一片空白。用菌液拿去测序，状态是失败的。如何解？
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8楼2015-11-01 11:51:04
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145457367

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

求助：菌体PCR有目的条带，可是双酶切一片空白，菌液测序结果失败？
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9楼2015-11-01 11:53:30
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