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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] 实验思路求助!

本人表达了一个古菌蛋白,这个蛋白在BL21(DE3)中发生断裂但是有较高活性,在Rosette中是完整的,因为目前还不能在古菌中表达外源蛋白,所以不知道这个蛋白生理条件下是什么状态的,因为现在其他课题任务很重,大家觉得我否应该搞清楚这个问题。
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闹太套
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biogefart

木虫 (著名写手)

no

是想搞清楚这个酶为什么会断裂,性质研究早做完了。
闹太套
3楼2008-08-27 15:40:41
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)


xyklmu(金币+1,VIP+0):积极交流奖
看样子你表达的这种蛋白初步认定是一种酶,意思是想作一下酶学性质和动力学性质,恐怕还没有必要,先证明是一个新东西,发了好文章再说!
2楼2008-08-27 14:16:20
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jasco

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):积极交流奖
BL21(DE3)中发生断裂,在Rosette中是完整的,这表明目的基因上有连续的稀有密码子,所以用前者表达就会发生目的蛋白被截短的现象,而换用能表达稀有密码子的菌株就能完整表达了
4楼2008-08-27 16:01:39
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lsp1018

木虫 (正式写手)

如果是发生了截短可能是由于表达系统细微差别造成的;
如果只是发生了断裂,可能是由于提取中被打断了。
5楼2008-08-27 17:16:04
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