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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 硅胶柱层析
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wlm0917

银虫 (正式写手)

[交流] 硅胶柱层析 已有11人参与

求教大神，过硅胶的层析柱能中断吗，一天过不完看来得过夜，可我不想熬夜
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superyeast

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1楼 2015-09-09 10:53:31
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
archbishop: 金币+2, 感谢应助。 2015-09-15 17:11:54
用200-400目的硅胶，在大而深的沙芯漏斗里湿法装柱，柱体积约600mL。花上十分钟拿个大号胶塞把柱床反复敲实。顶上铺两层滤纸，上样大约是30g原料在100毫升溶液中（用能溶解的最弱溶剂）。在底下稍微抽真空，接在250mL抽滤瓶里，200mL一个瓶，每瓶大约一两分钟装满。注意不断补充溶剂，不要走干。一边走一边点样，一个TLC板上点满6-8个样开始展开。最后根据TLC合并组分。这个柱子成功分离了Rf0.24 和 0.26的组分（只是上面一个“帽子”）。拿到20多克纯品，总共只有最头上一瓶和后面两瓶混合样，大约三四克的样子，拿走柱机过了一下。

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23楼2015-09-15 12:18:00
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永远的笑莲

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最好不要过夜，过夜的样品较为容易长菌。一旦有杂菌的污染，那么纯化所得到的蛋白产物质量就大打折扣，影像得率，甚至全部失效都可能。而且同一批样品最好一批做完，分批则有批次间误差。所以建议您计划好每天当天能处理的量。或者调整流速，缩短时间，一天时间全部做完。
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2楼2015-09-11 16:04:49
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海角捕鱼

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这样看你的要求，如果是合成的中间体的话，过夜一般没有问题，特殊情况下样品不稳定回分解或者死吸附，祝好运！
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null
3楼2015-09-11 16:13:26
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wlm0917

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 永远的笑莲 at 2015-09-11 16:04:49
最好不要过夜，过夜的样品较为容易长菌。一旦有杂菌的污染，那么纯化所得到的蛋白产物质量就大打折扣，影像得率，甚至全部失效都可能。而且同一批样品最好一批做完，分批则有批次间误差。所以建议您计划好每天当天能 ...

我不是分离蛋白质哎
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4楼2015-09-11 21:19:53
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