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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR求助 新手不懂 求大神指导 急急急！！！
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柳弯儿

新虫 (正式写手)

[求助] PCR求助 新手不懂 求大神指导 急急急！！！ 已有3人参与

用血液提取基因，老师设计引物，能P出目的基因。我看文献上目的基因分AA/TT/GG等基因型，请问大神这个是怎么出来的，单单是看目的条带的bp数吗？还是要做其他的实验？
之后要做酶切，这又有什么意义呢？
急求解释啊！
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1楼 2015-09-09 10:18:21
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hanyu426980

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-09 12:41:08
通过测序可以知道基因序列，酶切后要连接到载体上，用于保存基因或者后续的表达使用。
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2楼2015-09-09 10:41:50
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柳弯儿

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hanyu426980 at 2015-09-09 10:41:50
通过测序可以知道基因序列，酶切后要连接到载体上，用于保存基因或者后续的表达使用。

我们并不测序啊  简单pcr  然后酶切

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-09-09 16:39:46
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jeff瓜瓜

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 柳弯儿 at 2015-09-09 16:39:46
我们并不测序啊  简单pcr  然后酶切
...

不测序怎么知道PCR的目的条带是什么，是否正确。。。不测序的话引物都没法设计吧
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4楼2015-09-09 19:51:30
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ufo29119690

金虫 (小有名气)
是SSR吗？

发自小木虫Android客户端
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5楼2015-09-09 20:38:03
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kodey

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
突变部位正好有酶切位点，只要扩增出该位点的前后，然后酶切，如果没有突变，就可以切开，如果有突变就无法切开。
通过酶切判断有没有突变，很常用的方法。前提是野生或突变位点能被酶切开。
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6楼2015-09-10 10:03:33
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Esther_zhang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有酶切位点也没关系，可以在引物上引入一个酶切位点检测。最好的办法还是测个序，现在测序很便宜的。
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7楼2015-09-10 13:26:29
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柳弯儿

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Esther_zhang at 2015-09-10 13:26:29
没有酶切位点也没关系，可以在引物上引入一个酶切位点检测。最好的办法还是测个序，现在测序很便宜的。

嗯嗯 这个如果不测序  就是PCR出目的条带以后  然后又酶切  我的意思是 很多文献里 直接在电泳上根据片段大小不同 就确定了基因型  是这样的不
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8楼2015-09-14 09:27:09
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