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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

步骤请参照《分子克隆实验》指导第三版,下载个电子版即可!
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
11楼2015-09-15 20:17:28
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renyi2015

新虫 (小有名气)

12楼2015-09-15 21:19:10
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renyi2015

新虫 (小有名气)

13楼2015-09-15 21:19:53
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lggd2013

银虫 (初入文坛)

不好意思,我可能没说清楚。我是要做DNA的银染
14楼2015-09-16 13:55:06
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chyanqiu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的片段大小选胶浓度。我常用的是:
30%丙烯酰胺    6 mL
10×TBA          2 mL
水                  12 mL
10% APS        140 μL
TEMED           12 μL
合计             20 mL,15mm的板子,两块胶足够了。

电泳时用0.5的TBE,100V,根据你片段大小决定时间。一般1.5h左右溴酚蓝就跑出去了。

银染的话,我用的是:
固定液:10% 乙醇
氧化液:1% 硝酸
染色液:0.1% 硝酸银
显色液:2% 碳酸钠:无水碳酸钠6g,硫代硫酸钠 0.3mg,溶于300 mL 纯水中,用时加入37%甲醛0.4mL。
终止液:4%醋酸
注意:中间水洗的时候,用蒸馏水。我比较过,用自来水的背景很深,超纯水洗的背景超级干净。
仅供参考
15楼2015-09-16 16:55:07
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