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lggd2013

银虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法 已有3人参与

跪求聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法的相关知识
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chyanqiu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的片段大小选胶浓度。我常用的是:
30%丙烯酰胺    6 mL
10×TBA          2 mL
水                  12 mL
10% APS        140 μL
TEMED           12 μL
合计             20 mL,15mm的板子,两块胶足够了。

电泳时用0.5的TBE,100V,根据你片段大小决定时间。一般1.5h左右溴酚蓝就跑出去了。

银染的话,我用的是:
固定液:10% 乙醇
氧化液:1% 硝酸
染色液:0.1% 硝酸银
显色液:2% 碳酸钠:无水碳酸钠6g,硫代硫酸钠 0.3mg,溶于300 mL 纯水中,用时加入37%甲醛0.4mL。
终止液:4%醋酸
注意:中间水洗的时候,用蒸馏水。我比较过,用自来水的背景很深,超纯水洗的背景超级干净。
仅供参考
15楼2015-09-16 16:55:07
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jl.liu

新虫 (初入文坛)

哇塞,那得打多少字啊,强烈建议,百度一下
2楼2015-09-09 00:23:13
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chenruixi

金虫 (小有名气)

额,同意楼上的,虽然我也不懂

发自小木虫Android客户端
3楼2015-09-09 01:57:11
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lggd2013

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jl.liu at 2015-09-09 00:23:13
哇塞,那得打多少字啊,强烈建议,百度一下

主要是聚丙烯酰胺凝胶的制备,电泳条件的选择,银染试剂的制备,银染操作步骤。
4楼2015-09-09 11:21:29
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