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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » MTT的数值在0.02-0.07之间，是否不在MTT的可检测范围内呢？
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jhnini

铜虫 (小有名气)

[求助] MTT的数值在0.02-0.07之间，是否不在MTT的可检测范围内呢？ 已有1人参与

采用1cm*1cm的样品（表面改性膜层），放置于24孔板中，每孔1万个细胞(细胞悬液的浓度为1万个每毫升），在1,2,3,5天进行MTT测试。
MTT母液（5mg/ml)与培养基按体积比1:9先配制好，然后每孔加入1毫升 MTT+培养基 混合液，培养箱孵化，以MTT+培养基的混合液为空白组。培养4h后，抽走原液，每孔加入1ml异丙醇，摇床摇匀，再将每孔的异丙醇按100ul/每孔转移到96孔板中，进行酶标仪测量，波长570nm，630nm为参比。
空白组的值始终在0.007-0.009之间，但是样品的MTT值却很低，1天为0.02左右，5天后的值为0.07左右，倒是都还挺有规律的。
请问是否样品的数值在0.02-0.07之间，太低了，而不在MTT的可检测范围内呢？也就是说这样的数值是没有意义的？
貌似MTT的数值的最佳范围为0.7-1.5？不是很清楚。

求解惑，非常感谢~
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1楼 2015-09-08 20:49:15
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jennifermatt

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从数值上来看，是没有有效的OD值。可能的原因:细胞都死了。或者你的材料破坏了甲臜。如果是细胞死了，镜检很容易看到。如果是甲臜被破坏，设置空白孔，很容易发现。小问题。

发自小木虫Android客户端
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求是
2楼2015-09-09 00:26:28
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jhnini

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jennifermatt at 2015-09-09 00:26:28
从数值上来看，是没有有效的OD值。可能的原因:细胞都死了。或者你的材料破坏了甲臜。如果是细胞死了，镜检很容易看到。如果是甲臜被破坏，设置空白孔，很容易发现。小问题。
...

细胞肯定是有的，因为培养24h后做SEM，发现细胞量不少，还挺密的。
空白孔有设置，空白组的数值为0.007-0.009
不知道是不是最后一步的异丙醇的量加太多（1ml) 稀释了生成的甲瓒，导致OD数值偏低？
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3楼2015-09-13 22:41:28
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饿狼

新虫 (初入文坛)
请问楼主，你做的时候材料会不会吸附甲瓒？
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4楼2018-05-28 09:06:48
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