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jhnini

铜虫 (小有名气)

[求助] MTT的数值在0.02-0.07之间,是否不在MTT的可检测范围内呢? 已有1人参与

采用1cm*1cm的样品(表面改性膜层),放置于24孔板中,每孔1万个细胞(细胞悬液的浓度为1万个每毫升),在1,2,3,5天进行MTT测试。
MTT母液(5mg/ml)与培养基按体积比1:9先配制好,然后每孔加入1毫升 MTT+培养基 混合液,培养箱孵化,以MTT+培养基的混合液为空白组。培养4h后,抽走原液,每孔加入1ml异丙醇,摇床摇匀,再将每孔的异丙醇按100ul/每孔转移到96孔板中,进行酶标仪测量,波长570nm,630nm为参比。
空白组的值始终在0.007-0.009之间,但是样品的MTT值却很低,1天为0.02左右,5天后的值为0.07左右,倒是都还挺有规律的。
请问是否样品的数值在0.02-0.07之间,太低了,而不在MTT的可检测范围内呢?也就是说这样的数值是没有意义的?
貌似MTT的数值的最佳范围为0.7-1.5?不是很清楚。

求解惑,非常感谢~
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jennifermatt

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从数值上来看,是没有有效的OD值。可能的原因:细胞都死了。或者你的材料破坏了甲臜。如果是细胞死了,镜检很容易看到。如果是甲臜被破坏,设置空白孔,很容易发现。小问题。

发自小木虫Android客户端
求是
2楼2015-09-09 00:26:28
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jhnini

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jennifermatt at 2015-09-09 00:26:28
从数值上来看,是没有有效的OD值。可能的原因:细胞都死了。或者你的材料破坏了甲臜。如果是细胞死了,镜检很容易看到。如果是甲臜被破坏,设置空白孔,很容易发现。小问题。
...

细胞肯定是有的,因为培养24h后做SEM,发现细胞量不少,还挺密的。
空白孔有设置,空白组的数值为0.007-0.009
不知道是不是最后一步的异丙醇的量加太多(1ml) 稀释了生成的甲瓒,导致OD数值偏低?
3楼2015-09-13 22:41:28
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饿狼

新虫 (初入文坛)

请问楼主,你做的时候材料会不会吸附甲瓒?
4楼2018-05-28 09:06:48
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