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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 有机酸酶活性测定（紫外分光光度计连续扫描发）
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814593602

新虫 (初入文坛)

[求助] 有机酸酶活性测定（紫外分光光度计连续扫描发）

紫外分光光度计测定吸光度，0.02秒为单位连续扫描3分钟，以每分钟吸光度变化0.001为一个酶单位，酶活性以单位/克鲜重/分钟(Unit/g. FW•min)表示。
小弟初来贵宝地，没钱啊·····，没人呀····。望往来的好心人，帮忙，救我呀，跪谢啊，以下左边间隔0.02 的是时间，右边是相对应的吸光值，假设我的是0.2g样品磨碎，定容5ml,取取1ml于3ml反应体系中··········
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有机酸酶活性测定（紫外分光光度计连续扫描发）
有机酸酶活性测定.png
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1楼 2015-09-08 11:04:23
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rootcare

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
814593602: 金币+2, ★有帮助, 给了一些idea，但没有解决实际问题 2015-09-08 16:07:05
不知你测定上的酶具体名称？从你所发数据来看，吸光度变化不大，测试不是很理想。
影响因素：
（1）酶是否提取出来了？是否失活？
（2）是否是加入底物后立即进行吸光度的时间动力学扫描？还是加入底物后孵育了一定时间？
（3）加入反应体系中的酶提取液是否足够？
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努力与坚持
2楼2015-09-08 11:43:27
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814593602

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rootcare at 2015-09-08 11:43:27
不知你测定上的酶具体名称？从你所发数据来看，吸光度变化不大，测试不是很理想。
影响因素：
（1）酶是否提取出来了？是否失活？
（2）是否是加入底物后立即进行吸光度的时间动力学扫描？还是加入底物后孵育了一 ...

数据应该没有问题，测了大批量且有其他人测的也是如此。我是测细胞质乌头酸酶（c-Aco)、线粒体乌头酸酶(M-Aco)、异柠檬酸脱氢酶（NAD-IDH)、苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)等。实验数据本身变化不大，所以在计算说明处说“0.02秒为单位连续扫描3分钟，以每分钟吸光度变化0.001为一个酶单位”。望涉猎这方面的，不吝赐教······
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-08 16:07:02
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