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浅、浅_

新虫 (初入文坛)

[求助] 能否用超滤离心管分离不同分子量段的肽? 已有5人参与

本人现在做多肽的分离纯化,由于超滤膜不好定,准备用超滤离心管,不知道离心管能否将分子量不同的肽分开?离心管有3K、10K的,就想知道离心后能得到小于3K、3~10K、大于10K三个不同分子量段的肽吗?求各位大神帮解答~~
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lishuolin

铜虫 (小有名气)


99503102: 金币+1, 谢谢参与交流,以后可以应助回帖噢! 2015-09-08 14:13:41
你用超滤膜试过了吗?3K和10K的分子量太接近了,很难分开的,主要有两个方面:1、膜的切割精度不是完全绝对的,而且还和膜的材质有关系;另外一方面蛋白或者多肽的分布也不是绝对的,即使可以,膜污染也会比较严重。
2楼2015-09-08 13:58:21
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jiafang521

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
浅、浅_(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助,请继续为其他虫友解答噢! 2015-09-08 17:48:36
我做过肽段的分离,用的是超滤膜,速度比较慢,而且膜要经常清洗,但也没找到其他的方法,只能一点点分离,超滤膜应该还挺好订到的,超滤离心倒是没有试过。
3楼2015-09-08 17:17:23
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江湖君子

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
浅、浅_(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助!希望继续关注楼主问题哈! 2015-09-08 17:50:06
不能分离那么精确3-10K在一个级别内,小于一千,或大于一万用膜理论上可以,实际有偏差
少见的好帖真是TMD好帖难得一见的好帖千年等一回的好帖
4楼2015-09-08 17:22:17
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sqzhang

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
浅、浅_(99503102代发): 金币+3, 谢谢应助,请继续为其他虫友解答噢! 2015-09-18 16:57:55
本帖内容被屏蔽

5楼2015-09-08 21:32:46
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hackfeng0

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
浅、浅_(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助,请继续为其他虫友解答噢! 2015-09-18 16:58:17
我做过肽分子量的分离,分离的肽段正好和你的一样的。一开始就是用的超滤离心管,但是效果并不是很好,体现在分离3kd的时候得到的量不多,冻干后得到的肽粉量更少。用了段时间后果断换成了中空纤维柱进行分离,效果提升非常明显。建议中空纤维柱
保持自己,不忘因何前行
6楼2015-09-11 17:05:30
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浅、浅_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jiafang521 at 2015-09-08 17:17:23
我做过肽段的分离,用的是超滤膜,速度比较慢,而且膜要经常清洗,但也没找到其他的方法,只能一点点分离,超滤膜应该还挺好订到的,超滤离心倒是没有试过。

我最后还是用的超滤膜,感觉超滤离心管不是很靠谱。。

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-09-18 15:29:26
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浅、浅_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sqzhang at 2015-09-08 21:32:46
膜的孔径结果是一种正态分布,因此,它的分离结果也是正态分布。例如,孔径为10k的膜,它的分离结果是10k为中心的正态分布。好的膜,正态分布曲线比较窄,差的则比较宽。即便很窄,也不可能只分离出只有一种分子量的 ...

我也觉得分离效果可能不是太好,准备多级分离 应该会好些,

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-09-18 15:31:12
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MHSW

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

9楼2015-09-19 13:12:44
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