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su1154957

银虫 (小有名气)

[交流] 求助大肠杆菌感受态细胞问题

请问BL21(DE3)和BL21(DE3) plus是不是都是大肠杆菌的感受态细胞啊?这两个有什么区别呢?  我现在不记得自己当时做转化用的是哪一个了?plus到底是什么意思啊?当时不知道为什么也没有记录,现在想知道感受态的名称,不知道有什么方法可以确定我用的是哪一个吗?以后写论文也要用啊,不知道有什么弥补的办法吗?
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tianyinghu

金虫 (小有名气)


xyklmu(金币+1,VIP+0):感谢答复
PET 手册里有这些感受态细胞的作用,自己可以下一下看看,很不错的
2楼2008-08-26 21:21:14
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playboy723

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):积极交流奖
plus是说明细菌里面自带了一个质粒  好像是表达T7溶菌酶质粒  可以帮助裂解细菌   但诱导表达完成后  只要将离心后的菌在冰箱里反复冻融几次就可以自己裂解了   不用再外加溶菌酶了  所以操作教方便  但最好还是再用超声超一段时间
3楼2008-08-26 22:02:21
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流奖
BL21(DE3) plus  适用于T7启动子的载体
BL21(DE3)   适用于其他的启动子
4楼2008-08-27 11:35:18
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su1154957

银虫 (小有名气)

非常感谢各位!谢谢!谢谢!
5楼2008-08-27 22:10:09
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su1154957

银虫 (小有名气)

还想问一下各位,如果我把我的菌提取质粒,跑电泳,如果有两条质粒条带,就说明我用的感受态细胞是BL21(DE3)plus; 如果只有一条质粒带,就是BL21(DE3),从而确定出我到底用的那个感受态,这个方法可行吗?
6楼2008-08-28 21:24:59
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qfzhang

银虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流奖
质粒不同状态跑电泳的时候有不同的条带,超螺旋一条,线性一条,环状一条,半开环一条,看提取的质量
7楼2008-08-29 08:38:19
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

这种鉴定的方法没有用过
8楼2008-08-29 12:53:37
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mythqu

新虫 (初入文坛)

貌似电泳方法不能鉴定吧
基因克隆
9楼2008-08-29 13:50:12
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