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xiaojing459

银虫 (小有名气)

[交流] 二次PCR却p不出东西??

第一次p出了目的带,但当我用PCR产物作二次PAR时,却什么都没做出来,一样的试剂与条件,为什么啊!谢谢!
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yangym1123

木虫 (小有名气)


xiaojing459(金币+1,VIP+0):thanks
电泳结果是什么都没有还是有Smear?如果什么都没有,可以考虑重新做一次再验证是否有加样错误,如果有Smear需要将模板(第一次PCR产物)稀释一下再做哦!
2楼2008-08-26 21:03:56
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

可以稀释一下模板浓度 是在做巢式PCR吧 再做几次模板稀释浓度梯度
3楼2008-08-27 11:38:41
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

一般说来,用第一次的PCR产物做模板的话,至少引物中的一个要改变一下位置,即所谓的nest pcr
模板要稀释一下才可以用作模板,至少100倍稀释。
减少PCR的循环数
位卑未敢忘忧国。
4楼2008-09-02 16:04:09
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