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aben0114

银虫 (著名写手)

[交流] 关于柱层析和洗脱剂的问题?

各位高手,我是初入植化的新手,马上就要进行化学成分分离,由于以前从来没有接触过柱层析所以心里一直没底,虽然从论坛上看了很多关于柱层析方面的文章,但是没有一点实战经验,还希望各位不吝赐教。对于试验条件尤其不好只有普通的柱子是如何加压的?使用什么装置?还有就是用TLC选择好洗脱剂之后一般是要稀释一倍才可以上柱,请问是用什么进行稀释,比如两种溶剂的混合,用哪种稀释啊
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shhzhang

铜虫 (小有名气)

看来楼主确实是个植化新手,其实植物化学分离并不是太难,最难的是谱图解析鉴定化合物结构。看着你的意思,好像你要做的是硅胶柱层析,我希望我的回答对楼主有一点帮助。
先说选择流动相条件:第一是这种两元溶剂体系(有的一元也有三元,但一般两元)你的样品在此溶剂体系重要能有较好的分离效果。第二是选好体系后选择初始分离条件,就是tlc时,rf<0.2,我的经验是0.1效果较好。
再说常规柱子怎么加压:如果条件不好,那肯定是没有中压系统,只有常规的玻璃柱子,这时也好办,如果是过第一道大柱子,那么不用考虑加压问题,因为柱子粗而且选择硅胶100-200目,不需要加压,如果是过小柱,填料颗粒太细,那么可以制作一种加压工具,叫玻璃工师傅给你制作那种两个磨口的烧瓶,一个接柱子的磨口,一个接加压用的双连球,手动加压就行了。但是要注意的是加压不可过大。我说的也不知道你明白了没有,也许我还得找找图片给你看看才行。
5楼2008-08-27 21:33:32
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finely

铁杆木虫 (正式写手)

★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢应助^_^
用洗脱能力弱的溶剂稀释
2楼2008-08-26 15:51:34
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chengbrave5680

木虫 (正式写手)

★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢应助:)
加压就是用一个加压球就可以了,说白了就是一个塑料球,有一个单向阀。加压效果也蛮好的,只是加压的压力不稳定。或者可以去买一个养鱼用的氧气泵,直接接到柱子上面,也可以的!
3楼2008-08-26 16:32:40
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