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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母发酵产酶，如何提高收率
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ldy1985

木虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母发酵产酶，如何提高收率 已有1人参与

发酵液直接离心，得到65%左右的滤液。剩下的重相加水洗搅拌后再次离心，经过两次搅拌洗涤，但是总收率仍然不到80%，请问可有好的办法提高水洗的效果，我感觉酶液不能充分的溶解在水中，是不是应该对洗涤水进行调整了，如何调整
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1楼 2015-09-01 15:47:33
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
呵呵呵，有这功夫，你重新发一批好了。 1.  溶解不彻底，你用的纯水，还是缓冲液？溶剂的PH是否在其等点电？可以调PH,降低盐浓度，避免盐析。
2.你的蛋白是不是和酵母菌有吸附，可以尝试将菌破碎后在离心。祝实验顺利。
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2楼2015-09-02 08:52:09
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ldy1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-02 08:52:09
呵呵呵，有这功夫，你重新发一批好了。 1.  溶解不彻底，你用的纯水，还是缓冲液？溶剂的PH是否在其等点电？可以调PH,降低盐浓度，避免盐析。
2.你的蛋白是不是和酵母菌有吸附，可以尝试将菌破碎后在离心。祝实验顺 ...

用的纯水，离心出来的清液pH在4.2左右，那我是不是得用这个pH的水去洗了？我现在是中试生产，用缓冲液估计加的量太大了。
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3楼2015-09-02 09:02:53
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by ldy1985 at 2015-09-02 09:02:53
用的纯水，离心出来的清液pH在4.2左右，那我是不是得用这个pH的水去洗了？我现在是中试生产，用缓冲液估计加的量太大了。...

离心前，先调PH到7.0，你4.2只能收60%，还4.2离心啊，在不性直接板框过滤，离心可能没离干，或者加大离心力。
中试的话建议你过滤吧，量大你洗费时费力。一次滤干点。回收7，8十差不多。祝顺利
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4楼2015-09-02 09:10:20
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