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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

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fastpfu的酶可以试下,或是phusion的酶。我们实验室扩异源多倍体的材料8K的很容易就扩出来了
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
11楼2015-09-02 15:56:04
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flyy1986

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我经常扩增长片段,最长到20kb,自我感觉引物最重要,多设计些引物。我用的是NEB 2x HotStart LongAmp。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2015-09-02 18:31:56
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494750284

木虫 (小有名气)

你确定PCR有这种能力吗???如果不行,你试多久都没用啊!!

发自小木虫Android客户端
13楼2015-09-02 20:23:42
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你的电泳条带的弥散程度和我扩增6k时很像,你可以参考下,可能不适合。使用两步法,将退火和延伸设成相同的温度,设计引物Tm大于68℃,95℃10min,98℃10s,68℃延伸根据自己片段大小设。具体参照takara的 La taq说明书。

发自小木虫Android客户端
14楼2015-09-02 20:25:54
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