24小时热门版块排行榜    

查看: 3514  |  回复: 12

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 1297286362 at 2015-09-03 21:26:05
亲们,我找到原因了,我的PCR产物是高GC序列,做菌液PCR时一般的酶扩增的效果不好,我使用了primeSTAR,效果非常好,如果遇到类似的 问题可以借鉴一下。

哎,其实问题都很简单,只是一个酶,有的时候做实验久了,往往就不喜欢考虑最简单的原因了~还是优化体系,摸索条件,扩增当然不要用普通的酶了,我们都用热启动酶,或者热启动高保真酶,你的模板GC含量高,当然更不选择一般的酶了,楼主有待了解更多的酶种类啊,选择,适用性等等
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
11楼2015-09-06 09:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1297286362

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-09-06 09:40:01
哎,其实问题都很简单,只是一个酶,有的时候做实验久了,往往就不喜欢考虑最简单的原因了~还是优化体系,摸索条件,扩增当然不要用普通的酶了,我们都用热启动酶,或者热启动高保真酶,你的模板GC含量高,当然更不 ...

是的,但是我以前做的也是这个基因,PCR产物是480bp,也是高GC序列,用rTaq和ExTaq做出来过,我也不知道这是什么原因,不过还得谢谢亲提醒。
喜欢你就诅咒你!
12楼2015-09-11 20:59:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咸鱼~翻身

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 1297286362 at 2015-09-03 21:26:05
亲们,我找到原因了,我的PCR产物是高GC序列,做菌液PCR时一般的酶扩增的效果不好,我使用了primeSTAR,效果非常好,如果遇到类似的 问题可以借鉴一下。

之前的pcr没用这个酶,产物条带亮不亮
13楼2015-11-30 09:18:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1297286362 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见