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shanxw

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[求助] siRNA干扰蛋白和mRNA抑制率计算已有1人参与

实验设计化学合成了siRNA采用lipo2000进行细胞转染后，提取细胞蛋白和RNA进行western blot和qpcr实验，看到相关文献上有提到蛋白和mRNA抑制率的问题，不知应该怎么计算，求指导！

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1楼 2015-08-28 19:20:57

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evangelina

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shanxw: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-08-31 09:31:39

如果是western blot，就用image J 定量knockdown和control的条带的亮度，然后以control为百分之百去看knockdown的减少了多少。要有内参证明两边总量差不多。

如果是mRNA层面就用qPCR测出同等量的总mRNA里面，knockdown组的目标基因跟control比减少了多少。当然这个你也需要内参。

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2楼2015-08-28 20:59:19

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shanxw

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引用回帖:

2楼: Originally posted by evangelina at 2015-08-28 20:59:19
如果是western blot，就用image J 定量knockdown和control的条带的亮度，然后以control为百分之百去看knockdown的减少了多少。要有内参证明两边总量差不多。

如果是mRNA层面就用qPCR测出同等量的总mRNA里面，kno ...

非常感谢！

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3楼2015-08-31 09:31:45

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