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布宜诺斯880

银虫 (小有名气)

[求助] 液相制备问题求大婶 已有9人参与

求教一下大婶,那个液相刚开始用40%-65%乙腈走大概在9分多钟出峰,然后反过来用75%-40%乙腈走C18柱时在5分多钟出来,二者进样一样不是应该在相同的浓度出峰吗,怎么会出现这样呢?
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-05 19:59:58
如果你第一个梯度也是走的C18的话,那只能说去好好的看一下反相的原理再说了,一个是洗脱能力增强、一个是洗脱能力降低,他们怎么就一样了………………
3楼2015-08-28 19:46:23
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Alexlzb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-05 20:00:03
为什么要走75%到40%啊?
一般是在40%到65%找一个合适的等度制备

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-08-28 17:27:14
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cyr001

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-05 20:00:09
不知道你为啥这样做。赞Alexlzb
4楼2015-09-01 06:13:09
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duliyu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-05 20:00:15
你流动相的极性变了,出峰时间肯定会有所不同,再说你的色谱柱一样不(怎么后者突然强调色谱柱了),再说制备用一般在40-60之间,你的呵呵 特例还是仅仅是尝试,

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

守候之戒
5楼2015-09-01 08:26:20
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布宜诺斯880

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Alexlzb at 2015-08-28 17:27:14
为什么要走75%到40%啊?
一般是在40%到65%找一个合适的等度制备

恩,我原先是一直等梯度制备,现在就想换个梯度制备,然后用40%-65%乙腈第一针分出了三个峰,然后接下的几针同样条件走直接就出一个峰,而且算了下大概在55%乙腈9分钟出的峰,想看看是不是柱子问题,就用75%-40%乙腈走,如果没问题应该也是在55%乙腈出峰的,但是出来的峰换算下大概在69%的乙腈出的,今天我师妹走同样那根柱子都走的挺好的,我就想不明白为什么我的就出现这个情况
6楼2015-09-01 10:25:27
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布宜诺斯880

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenjiajiang198 at 2015-08-28 19:46:23
如果你第一个梯度也是走的C18的话,那只能说去好好的看一下反相的原理再说了,一个是洗脱能力增强、一个是洗脱能力降低,他们怎么就一样了………………

出峰时乙腈浓度不是应该一样吗?40%-65%大概在55%乙腈出的峰,75%-40%换算后在69%左右出的峰?大神求解啊
7楼2015-09-01 10:27:56
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布宜诺斯880

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cyr001 at 2015-09-01 06:13:09
不知道你为啥这样做。赞Alexlzb

看看是不是柱子问题,但是已经验证不是,就解释不了为什么是这样了。
8楼2015-09-01 10:29:07
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布宜诺斯880

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by duliyu at 2015-09-01 08:26:20
你流动相的极性变了,出峰时间肯定会有所不同,再说你的色谱柱一样不(怎么后者突然强调色谱柱了),再说制备用一般在40-60之间,你的呵呵 特例还是仅仅是尝试,

梯度洗,极性变了,但是不是应该在相同的浓度出来的吗?色谱柱一样没换,这不是40%-60%条件制备不好就想变变。还有求别呵呵
9楼2015-09-01 10:31:56
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吕小布110

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-05 20:00:23
引用回帖:
6楼: Originally posted by 布宜诺斯880 at 2015-09-01 10:25:27
恩,我原先是一直等梯度制备,现在就想换个梯度制备,然后用40%-65%乙腈第一针分出了三个峰,然后接下的几针同样条件走直接就出一个峰,而且算了下大概在55%乙腈9分钟出的峰,想看看是不是柱子问题,就用75%-40%乙 ...

55%出峰, 并不代表仅仅55%有洗脱能力。一般而言75%洗脱能力更强,当然出峰时间更快了。

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10楼2015-09-01 10:50:45
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