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嘻嘻小巫

金虫 (小有名气)

[求助] 小样本线粒体(斑马鱼胚胎)基因组怎样提取?提取量可以PCR用于鉴定就可以

希望提取mitochondrial-dna,直接PCR后用于跑胶鉴定,所以提取出的MITO-DNA可以PCR就可以。
已经尝试用普通提取基因组的方法:
NAOH溶液,95°加热溶解,之后加入Tris.Hcl,直接取一点PCR,但是跑胶没有条带。
分析原因:
1.线粒体基因组不够,因为每组我只有5胚胎,是否可以通过增加模板量解决?
2. Run PCR program 不对,我用的是普通PCR的program。
3. 本方法没法提取出线粒体DNA。
4. 引物问题,目的长度200bp,primer为20pb,是否设计鉴别mito的primer也和普通的不同呢?
请问大家都是怎么提取线粒体基因组的?针对我的实验目的,请教各位有什么好的protocol或者试剂or kit可以用,因为鉴定组别多,要求就是越省时越好。
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