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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 融合蛋白的基因中可以同时有两个Kozak序列吗
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蛇精病范

新虫 (初入文坛)

[求助] 融合蛋白的基因中可以同时有两个Kozak序列吗 已有1人参与

我要用pEGFP-C1载体表达一个目的基因，本来这个载体中已经有Kozak序列，我的引物中还有一个Kozak序列，两个Kozak序列存在可以吗？
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1楼 2015-08-26 11:42:50
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-08-26 23:05:30
我觉得pEGFP-C1原本的Kozak已经很强了，所以如果你的基因放在EGFP后面，ribosome基本上会无视第二个Kozak

不过这样的话第二个Kozak会被翻译出来，就在连接处会多一些东西，据说这样不大好
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2楼2015-08-26 11:53:16
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蛇精病范

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by evangelina at 2015-08-26 11:53:16
我觉得pEGFP-C1原本的Kozak已经很强了，所以如果你的基因放在EGFP后面，ribosome基本上会无视第二个Kozak

不过这样的话第二个Kozak会被翻译出来，就在连接处会多一些东西，据说这样不大好

那请问一下，连接处多了氨基酸为什么不大好啊，有什么影响吗，主要是我想用同一个引物，所以放在pEGFP-C1中就会多一个Kozak
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3楼2015-08-26 15:57:19
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evangelina

无虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蛇精病范 at 2015-08-26 15:57:19
那请问一下，连接处多了氨基酸为什么不大好啊，有什么影响吗，主要是我想用同一个引物，所以放在pEGFP-C1中就会多一个Kozak...

那多了些无谓的东西当然不好啦，如果出了什么结果，也不能排除是因为它造成的假阳性啊，虽说几率不高啦
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4楼2015-08-26 17:01:04
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