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蛇精病范

新虫 (初入文坛)

[求助] 融合蛋白的基因中可以同时有两个Kozak序列吗 已有1人参与

我要用pEGFP-C1载体表达一个目的基因,本来这个载体中已经有Kozak序列,我的引物中还有一个Kozak序列,两个Kozak序列存在可以吗?
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evangelina

无虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-08-26 23:05:30
我觉得pEGFP-C1原本的Kozak已经很强了,所以如果你的基因放在EGFP后面,ribosome基本上会无视第二个Kozak

不过这样的话第二个Kozak会被翻译出来,就在连接处会多一些东西,据说这样不大好
2楼2015-08-26 11:53:16
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蛇精病范

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by evangelina at 2015-08-26 11:53:16
我觉得pEGFP-C1原本的Kozak已经很强了,所以如果你的基因放在EGFP后面,ribosome基本上会无视第二个Kozak

不过这样的话第二个Kozak会被翻译出来,就在连接处会多一些东西,据说这样不大好

那请问一下,连接处多了氨基酸为什么不大好啊,有什么影响吗,主要是我想用同一个引物,所以放在pEGFP-C1中就会多一个Kozak
3楼2015-08-26 15:57:19
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evangelina

无虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蛇精病范 at 2015-08-26 15:57:19
那请问一下,连接处多了氨基酸为什么不大好啊,有什么影响吗,主要是我想用同一个引物,所以放在pEGFP-C1中就会多一个Kozak...

那多了些无谓的东西当然不好啦,如果出了什么结果,也不能排除是因为它造成的假阳性啊,虽说几率不高啦
4楼2015-08-26 17:01:04
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