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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请教芽孢杆菌基因敲除后的回复突变研究方法和相关操作！
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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子

[求助] 请教芽孢杆菌基因敲除后的回复突变研究方法和相关操作！ 已有1人参与

请教各位大牛在敲除苏云金芽孢杆菌某个基因后，如何做回复突变，是用当时构建的敲除载体连接该基因片段？或者用一个表达载体连接该基因片段？ 另外该基因片段要是一个完整的阅读框嘛，包括启动子之类的？？  跪求大牛指导
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麻辣王子不爱做实验
1楼 2015-08-24 10:31:26
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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by smokedfish at 2015-08-24 16:18:27
敲除之后做互补啊  找一个能在你敲除的Bt中能够表达的载体，连上你之前敲掉的基因   如果没有在那里面表达的载体那就只能靠你自己去构建了 这时才需要考虑启动子什么的  有的话就直接用CDS序列 注意不要移位就OK了

如果有能在Bt中表达的载体，我直接把基因的CDS序列连接在多克隆位点是吗？
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麻辣王子不爱做实验
3楼2015-08-25 09:06:45
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smokedfish

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zht930528: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-08-25 09:03:21
敲除之后做互补啊  找一个能在你敲除的Bt中能够表达的载体，连上你之前敲掉的基因   如果没有在那里面表达的载体那就只能靠你自己去构建了 这时才需要考虑启动子什么的  有的话就直接用CDS序列 注意不要移位就OK了
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zht930528
井底之蛙
2楼2015-08-24 16:18:27
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