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feilovexia20金虫 (小有名气)
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[求助]
DEAE纤维柱过中性蛋白拖尾?
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| 我用的是DEAE纤维柱用水泡涨后分别用0.5M NaOH 浸泡,水洗至中性,0.5M盐酸浸泡,再洗至中性,装柱后,用1M NaCl洗涤,再用20mM pH=7的磷酸缓冲液平衡后上样,蠕动泵进样,过的是中性蛋白,第一次(好用)过完蛋白后,用1M的NaCl洗脱,再用20mM pH=7的磷酸缓冲液平衡好后进行第二次上样,发现蛋白只沿着柱子的一边流下,而且严重的拖尾,因为这样的事情在我多次遇到,但苦于找不到解决办法,故求助于各位大神,望各位大神不吝赐教!谢谢 |
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