| 查看: 1233 | 回复: 4 | |||||
| 当前主题已经存档。 | |||||
[交流]
mtt法的具体操作步骤
|
|||||
本人系微生物专业学生，现在因实验研究需要，进行生物支架材料与细胞的培养，组织工程方面的项目，现向大家请教有关MTT法测定细胞活力的详细实验步骤，万分感谢！注：要测定的细胞活力是附着在多孔支架材料上的，怎么才能科学的分析细胞活力？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 荧光探针及表征 | 细胞培养 |
» 猜你喜欢
384求调剂
已经有6人回复
-
生物学学硕求调剂
已经有4人回复
-
081700 调剂 267分
已经有6人回复
-
一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂
已经有8人回复
-
269求调剂
已经有4人回复
-
一志愿211 初试270分 求调剂
已经有5人回复
-
265求调剂
已经有10人回复
-
327求调剂
已经有3人回复
-
材料专业求调剂
已经有9人回复
-
291求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2008-09-01 00:43:16
★ ★ ★ ★ ★
xyklmu(金币+5,VIP+0):感谢分享，积极交流
xyklmu(金币+5,VIP+0):感谢分享，积极交流
|
MTT????????衢???????????????????? MTT??? MTT????3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide?????????? 3-(4??5-?????????-2)-2??5-??????????????Σ??????????????????????????????? MTT????????????????????????????????????????????????????е????????????????????MTT?????????????????????趣?Formazan??????????????У??????????????????????????DMSO???????????е??趣????????????????490nm???????????????????????????????????????????????Χ???MTT???γ???????????????????÷???????????Щ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????á? ???????????MTT??????????????趲???????????豻????????????????????????????????????????????????????????л????????????????? MTT ???????????? ?????????е?MTT ????5mg/ml????????????MTT 0.5???????100 ml???????????PBS????????????????У???0.22??m????????????????????????4?? ????漴?ɡ????????????????У?????????????????????????????????????????????????????????????á? ??????????MTT???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????MTT ??????????0-0.7 ??Χ??? MTT???????????????????4ºC?????????????Ч?????????5mg/ml??????-20???????棬??????????????С??????????????????????????????????????????????MTT??????EP??????????????????????????м??????????????????,????MTT???????????????????????? MTT???°??????????С??,?????????????????????????.????MTT????????MTT????????У???96?????????????й??????????????????????????????????????????????. ????MTT???PBS??ph=7.4?????PBS????Nacl 8g ?? Kcl 0.2g ?? Na2HPO4 1.44g ?? KH2PO4 0.24g??pH 7.4,????1L?? ???MTT????鲽?裺 1????????????ú?10???С?????????????????????????????1000-10000??? ???????96??壬??????200ul. 2: ???????????????????????????3-5?????????????????????????????? 3???????????3-5???????MTT?????5mg/ml??PBS?????pH=7.4)20ul.????????4 h?? ?????????С????????????????????????????????????????????????????????????? ????150ul DMSO????10min???????????? 4??????????490nm???????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????? ???MTT????鲽?? ????????? 1: ??????????????????????????????????100ul,???????????????? 1000- 10000 ???????????????PBS????? 2: 5%CO2??37????????????????????????96?????壩,??????????????,?????? ?????????????????С??????????????????????????????壬???????? ???.???5-7?????,???100ul,??3-5??????.??????5???????????????????? 3: 5%CO2??37?????16-48С???????????????? 4: ??????20ulMTT?????5mg/ml????0.5%MTT????????????4h?????????MTT???????? ???????????????????С????PBS??2-3????????MTT????????? 5: ?????????С???????????????? 6: ??????150ul???????????????????????10min??????????????????? ??????OD490nm?????????????????? 7: ???????????????????MTT???????????????????????????????????????? ??????????MTT??????????????? ????????? 1: ???????????????????????????1??106/ml?????????????1640??????壩?? ????40ul ?????Actinomycin D???ж????10ul?????????? (?????100mg/ml??????????????????1:10-1:20)??????????10ul??????????50ul????5??104cell/???????100ul????96??壨???????????????????????????100ml 1640?? 2: ??37?棬5%CO2????16-48С???????????????? 3: ??????10 ul MTT?????5 mg/ml????0.5%MTT????????????4 h????????????????? WST-1??????4 h???????????4??????????????????OD570nm??630nmУ??????????????????? 4???????1000?x10min????С?????????壬??????100 ul???????????????????????10 min?????????????????????????OD570nm??630nmУ??????????????????? 5?????????????????????MTT??????????????????????????????????????????????????MTT???????????????????趨3????? ??????? (1) ??????????????????? (2) ???????????????С??10??????????????????????顣?????????????? ???????????? (3) ????????????????в?????????????????????????????鲽?豣?????? ???????????? (4) MTT??????????????0-0.7????????????Χ???????????? (5) ??96????????????MTT?????????,??ü????1640??????,????MTT??DMSO???? ????????????200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO ??DMSO????????????????????? DMSO?????H???????б???? (6) ??????4000???????????????????20000??/ml??MTT??20ul????????С??????????????????????????????????150ul DMSO??????????????10???????????????? |
3楼2008-09-01 11:53:50
4楼2009-02-06 16:29:59
5楼2009-02-11 15:34:13
