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platanus

木虫 (著名写手)

[交流] 求助:关于质粒转农杆菌

最近构建载体,前期的载体已经构建好了,但是在转农杆菌的时候老是会污染,用的是卡那的抗生素。我想请教各位大侠,到底哪一步容易引起污染。还有别人建议我在里面加利福平,但是利福平的使用方法我查不到,请教各位大虾指教!谢谢了!
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董文娟

金虫 (小有名气)

师姐最近在做 用了三种抗生素 用的菌种是GV3101
但也要看你转的质粒和农杆菌有什么抗性
这有篇文献 可以参考下  (有超链接)
农杆菌介导CBF3基因转化扶芳藤的研究*
含利福平50mg·L-1、卡那霉素50mg·L-1、四环素2mg·L-1、庆大霉素40mg·L-1



楼主还是勤劳点  多上网查查资料文献吧

[ Last edited by 董文娟 on 2008-9-26 at 12:24 ]
4楼2008-09-26 12:10:33
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
转化农杆菌你用的是电击还是热击
你说的污染指什么
抗生素要用对 转到农杆菌要用卡那,利福平,链霉素 三种抗性 我用的是LBA4404 电转和热转都没有问题
2楼2008-08-22 11:10:25
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platanus

木虫 (著名写手)

我用的是热转,抗生素用了卡那,污染是指皿上会有一层杂菌,你说的三种抗生素是一起用的吗?
3楼2008-08-23 10:14:42
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