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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

[交流] his纯化标签和his-tag是一样的吗? 已有6人参与

急!!前辈们,求助。。。his纯化标签和his-tag是一样的吗?如果为了方便纯化,若两者一样,在目的蛋白上加6个his就可以了吗?若不一样,有什么不一样,是序列吗,哪个才能被用来做纯化标签啊,谢谢!
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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

补充:刚看到文献说tag可以是融合标签或伴侣蛋白,我想请教的是这些对宿主菌有要求吗,只适用于大肠还是也可用于其他菌,比如酵母呀
2楼2015-08-21 10:56:12
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a86052

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 99蜗牛99 at 2015-08-21 10:56:12
补充:刚看到文献说tag可以是融合标签或伴侣蛋白,我想请教的是这些对宿主菌有要求吗,只适用于大肠还是也可用于其他菌,比如酵母呀

his-tag就是his标签了~一般载体上都是有其相应编码序列的,把你的蛋白基因连接在合适位置就行~也可以自己加~可以用于酵母,但是有相应的载体
3楼2015-08-21 11:03:09
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673643401

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是的啊 只是书写形式的不同
4楼2015-08-21 12:28:09
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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by a86052 at 2015-08-21 11:03:09
his-tag就是his标签了~一般载体上都是有其相应编码序列的,把你的蛋白基因连接在合适位置就行~也可以自己加~可以用于酵母,但是有相应的载体...

但是从文献中看,his与tag是两种不同的序列,tag可以是融合蛋白图示见word附件: 融合蛋白的N  端带有 " 6个组氨酸标签 ,因此可通过Ni-NTA 亲和层析进行纯化; 在融合标签( 或伴侣蛋白) 与克隆位点之间设计具有高度专一性的
烟草蚀刻病毒蛋白酶( 532) 酶切位点,而有助于融合蛋白的分离。

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  • 2015-08-22 10:53:22, 65.5 K
5楼2015-08-22 11:00:52
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mazhenggen

铁虫 (正式写手)

是一样的

[ 发自小木虫客户端 ]
我喜欢所以我做
6楼2015-08-23 11:41:08
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ssswzf

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
2个是一样的!
不管你是怎么做,只要保证有his蛋白表达就可以用来纯化!有问题了可以和我们都沟通,我们一直在做相关的实验,Q619857031
7楼2015-08-24 10:06:21
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
His-tag跟His标签一样,都叫多聚组氨酸标签,通常应用于原核蛋白表达纯化中的亲和层析法,文章的话可以看看这个介绍:多聚组氨酸标签介绍
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
8楼2015-08-24 10:40:18
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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ssswzf at 2015-08-24 10:06:21
2个是一样的!
不管你是怎么做,只要保证有his蛋白表达就可以用来纯化!有问题了可以和我们都沟通,我们一直在做相关的实验,Q619857031

好的 ,太感谢了
9楼2015-08-24 14:23:37
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htmlzycq

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一样的,就是中文名和英文名的区别。这六个组氨酸有加在N端的,有加在C端的,甚至还有加在中间的(融合蛋白的连接肽旁边),关键是在纯化的时候能暴露在表面与Ni2+结合。其它蛋白标签见https://en.wikipedia.org/wiki/Protein_tag
10楼2015-08-24 21:50:45
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