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战歌2008

银虫 (小有名气)

[求助] 酚氯仿抽提DNA,最后一步冰异丙醇沉淀DNA出现大块果冻状沉淀已有3人参与

RT。酚氯仿抽提动物组织DNA,最后一步加入冰异丙醇离心后,出现大块半透明果冻状沉淀。在大块沉淀的边缘,看到像是DNA的白色沉淀。
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我前几天也是用酚氯仿法提取DNA,不过是细菌的总DNA,我是在加完细胞裂解液破碎之后发现有果冻状物质,但是我都倒掉了,只留着沉淀,还有我们是异丙醇过夜,第二天上午用冰的70%乙醇沉淀。
2楼2015-08-20 11:04:14
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meridian_lee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

酚氯仿抽提DNA原理比较简单,如果提取组织DNA和真核细胞DNA需要注意的SDS裂解一般没有问题,蛋白酶K一定要消化充分,从你的描述看  有两种情况,第一种你运气很好,组织DNA含量较高提取到了较多DNA;还有一种情况就是组蛋白没有被降解,提取的DNA中含有大量组蛋白,可能会影响后续的pcr。
3楼2015-09-06 10:13:31
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蜈蚣出门

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

大块果冻状应该是杂质,一般这样的DNA扩增效果不好,如果还有样品建议重提,样品珍贵的话就加RNA酶纯化下

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-06 15:18:30
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