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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 酚氯仿抽提DNA，最后一步冰异丙醇沉淀DNA出现大块果冻状沉淀
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战歌2008

银虫 (小有名气)

[求助] 酚氯仿抽提DNA，最后一步冰异丙醇沉淀DNA出现大块果冻状沉淀 已有3人参与

RT。酚氯仿抽提动物组织DNA，最后一步加入冰异丙醇离心后，出现大块半透明果冻状沉淀。在大块沉淀的边缘，看到像是DNA的白色沉淀。
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1楼 2015-08-19 18:21:09
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我前几天也是用酚氯仿法提取DNA，不过是细菌的总DNA，我是在加完细胞裂解液破碎之后发现有果冻状物质，但是我都倒掉了，只留着沉淀，还有我们是异丙醇过夜，第二天上午用冰的70%乙醇沉淀。
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2楼2015-08-20 11:04:14
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meridian_lee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

酚氯仿抽提DNA原理比较简单，如果提取组织DNA和真核细胞DNA需要注意的SDS裂解一般没有问题，蛋白酶K一定要消化充分，从你的描述看  有两种情况，第一种你运气很好，组织DNA含量较高提取到了较多DNA；还有一种情况就是组蛋白没有被降解，提取的DNA中含有大量组蛋白，可能会影响后续的pcr。
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3楼2015-09-06 10:13:31
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蜈蚣出门

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

大块果冻状应该是杂质，一般这样的DNA扩增效果不好，如果还有样品建议重提，样品珍贵的话就加RNA酶纯化下

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4楼2015-09-06 15:18:30
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