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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 一步法RT-PCR可以使用dUTP代替dTTP，并使用UNG酶吗？
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wei13810

新虫 (初入文坛)

[求助] 一步法RT-PCR可以使用dUTP代替dTTP，并使用UNG酶吗？ 已有2人参与

我在做一步法RT-PCR，想做成防污染体系，把dTTP换成dUTP，并加入UNG酶，可以吗？
在逆转录过程中，会合成带dU的cDNA模板，会被UNG酶给降解了吗？为什么？
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1楼 2015-08-19 15:51:58
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许彦

木虫 (正式写手)
也想学习，求大神☺。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-08-19 16:17:41
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xiaoguabu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以的，但是不要都换成dutp ,可以在体系中，加部分dUTP。。 dUTP会降低一些检测灵敏度的。
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3楼2015-09-17 15:21:01
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芋大湿

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoguabu at 2015-09-17 15:21:01
可以的，但是不要都换成dutp ,可以在体系中，加部分dUTP。。 dUTP会降低一些检测灵敏度的。

请问“dUTP会降低一些检测灵敏度的。”的原理是什么呢
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4楼2020-07-29 09:55:31
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一边逆转录，一边降解产物，ct会后推6~7个
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核酸提取与Taqman诊断
5楼2020-08-06 08:39:58
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

但如果你混合2种，基本也没啥去污染作用了。所以一般RT-qPCR mix都不加dUTP
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核酸提取与Taqman诊断
6楼2020-08-06 08:40:51
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