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一步法RT-PCR可以使用dUTP代替dTTP,并使用UNG酶吗?
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wei13810
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一步法RT-PCR可以使用dUTP代替dTTP,并使用UNG酶吗?
已有2人参与
我在做一步法RT-PCR,想做成防污染体系,把dTTP换成dUTP,并加入UNG酶,可以吗?
在逆转录过程中,会合成带dU的cDNA模板,会被UNG酶给降解了吗?为什么?
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2015-08-19 15:51:58
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许彦
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注册: 2015-06-15
性别: GG
专业: 生物技术药物
也想学习,求大神☺。
[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼
2015-08-19 16:17:41
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xiaoguabu
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专业: 水产生物免疫学与病害控制
【答案】应助回帖
可以的,但是不要都换成dutp ,可以在体系中,加部分dUTP。。 dUTP会降低一些检测灵敏度的。
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3楼
2015-09-17 15:21:01
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专业: 水产生物免疫学与病害控制
引用回帖:
3楼
:
Originally posted by
xiaoguabu
at 2015-09-17 15:21:01
可以的,但是不要都换成dutp ,可以在体系中,加部分dUTP。。 dUTP会降低一些检测灵敏度的。
请问“dUTP会降低一些检测灵敏度的。”的原理是什么呢
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4楼
2020-07-29 09:55:31
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
一边逆转录,一边降解产物,ct会后推6~7个
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核酸提取与Taqman诊断
5楼
2020-08-06 08:39:58
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【答案】应助回帖
但如果你混合2种,基本也没啥去污染作用了。所以一般RT-qPCR mix都不加dUTP
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核酸提取与Taqman诊断
6楼
2020-08-06 08:40:51
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