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baotao099木虫 (正式写手)
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[求助]
采用2,4-二硝基苯肼法测定水果中抗坏血酸的时候为什么平行组的数据差距很大？ 已有1人参与
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1、我测得所有平行组数据都相差很大，这是哪里出问题了呢？ 2、最后加硫酸的时候，以及反应30min是不是要很精确啊，我是5个样品一起做的，会不会影响很大？ 3、还有一组的吸光值，空白都比样品要大，好奇怪 4、在测得标准曲线的时候，空白是只要一个水呢，还是每组浓度都做一个空白？ |
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mixi113
铁杆木虫 (正式写手)
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感谢参与，应助指数 +1
baotao099: 金币+50, ★★★★★最佳答案 2015-08-18 11:15:47
sytucom: 金币+2, 回帖很精彩 2015-08-18 11:38:56
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sytucom: 金币+2, 回帖很精彩 2015-08-18 11:38:56
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1、所有平行组数据差异较大，主要是操作的问题吧。 （1）移液管、吸量管或者移液枪的使用是否正确，这个会影响数据结果，但不会使数据差异太大； （2）加酸后是否完全混匀，这一步往往会忽略，觉得在规定时间里保持冰浴状态加酸就可以了，但是加酸的时候混匀力度不够，使得呈色反应不完全，从而产生较大的数据差异。 （3）每个平行样的呈色反应时间没有控制好，有的测定时反应时间30min，但是有的测定时反应时间已经40min了，这样也会引起较大的误差。 2、加酸的时间不需要太准确，大致在一分钟左右即可；反应时间要控制严格一些；由于测定时样品较多，楼主有5个样品，也不少了，建议加酸时，拉开时间差，便于后面测定吸光度。我的操作习惯是加酸后，确保混匀后记录反应时间；一个样品的加酸操作总共需要3min左右，从而每个样品保持了3min的时间差，在测定吸光度的时候不至于手忙脚乱。 3、“空白的吸光值都比样品要大”，这个情况在没有误操作的前提下，有可能活性炭有些问题。很多虫友就是因为活性炭的问题，试验结果一直很糟糕，这里推荐使用国药集团的分析纯颗粒状活性炭。但是如果你的其他组都很正常，初步估计是误操作。 4、首先，标曲的空白不是水，而是相对应浓度的VC溶液，因此每组浓度都做一个空白。 |
2楼2015-08-18 10:29:12
