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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 多糖纯化求助
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孜然呆

新虫 (初入文坛)

[求助] 多糖纯化求助 已有3人参与

现在在做植物多糖的分离纯化，我用的是DEAE-52的纤维素柱，用水、0.05、0.1、0.2、0.3mol/L的NaCl 梯度洗脱，每个梯度收集20管，每管收集10ml。收集后用苯酚硫酸法测，有峰，纯水洗脱的峰比较好，后面0.05mol/L的峰有两个,而且两个峰没有完全分开，求助各位大神这个问题的原因求教该如何解决。非常感谢！
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1楼 2015-08-17 19:24:04
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99503102

版主 (著名写手)
0.1、0.2、0.3mol/L的NaCl 是什么情况呢？也是两个未分开的峰吗？
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微信公众号：食安小屋
2楼2015-08-17 19:26:39
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孜然呆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2015-08-17 19:26:39
0.1、0.2、0.3mol/L的NaCl 是什么情况呢？也是两个未分开的峰吗？

0.1和0.2是分开的峰，0.3没有峰了
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3楼2015-08-17 20:02:56
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99503102

版主 (著名写手)
sytucom: 非常感谢，请选择应助，并请继续关注楼主回复。 2015-08-18 13:34:38
引用回帖:
3楼: Originally posted by 孜然呆 at 2015-08-17 20:02:56
0.1和0.2是分开的峰，0.3没有峰了...

那你的洗脱效果还是不错的哦，你想解决的问题是啥？0.05mol/L的峰分开？
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微信公众号：食安小屋
4楼2015-08-17 23:22:14
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孜然呆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 99503102 at 2015-08-17 23:22:14
那你的洗脱效果还是不错的哦，你想解决的问题是啥？0.05mol/L的峰分开？...

恩 是的哦 刚刚开始做这一块 还不太懂 峰出现重叠的原因可能有哪些呢？ 感谢赐教~
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5楼2015-08-18 11:11:22
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
孜然呆(sytucom代发): 金币+2, 回帖很精彩 2015-10-20 14:16:55
引用回帖:
5楼: Originally posted by 孜然呆 at 2015-08-18 11:11:22
恩 是的哦 刚刚开始做这一块 还不太懂 峰出现重叠的原因可能有哪些呢？ 感谢赐教~...

峰出现重叠原因比较多了，柱子类型、填柱材料等、还有比如低浓度钠盐提供的吸附力与不同多糖组分相似，导致不能完全分离两种组分。关于这方面的知识可以看看柱层析方面的内容。我也不是专门做这方面的，只是以前在学校接触过，可能还没你懂得多，共同学习吧。
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微信公众号：食安小屋
6楼2015-08-18 13:49:08
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孜然呆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 99503102 at 2015-08-18 13:49:08
峰出现重叠原因比较多了，柱子类型、填柱材料等、还有比如低浓度钠盐提供的吸附力与不同多糖组分相似，导致不能完全分离两种组分。关于这方面的知识可以看看柱层析方面的内容。我也不是专门做这方面的，只是以前在 ...

好的，多谢您的回复
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7楼2015-08-18 14:07:20
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wellasm

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
孜然呆(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，多谢 2015-10-20 14:17:06
纯水洗脱的峰比较好的话，可以把每个峰都收集起来去做个质谱，确定一下聚合度，
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8楼2015-08-18 23:10:33
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
sytucom: 应助指数+1 2015-11-10 22:00:06
孜然呆(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2015-11-26 22:38:55
孜然呆(99503102代发): 金币+1, 回帖很精彩，继续加油！ 2016-01-18 12:39:37
0,05M氯化钠洗脱出现重叠的峰，这是一两次出现这样的情况还是一直是这样的情况呢？如果还需要进一步纯化，我倒觉得有重合的峰也无所谓，毕竟还要进一步纯化的。如何你想它分开那只能再设其他梯度试试了
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9楼2015-11-09 18:42:07
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剑客

木虫 (知名作家)
DEAE-52的纤维素柱流的快么?为什么我的用水始终洗不下来,流不动,收集不到流出液呢
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10楼2017-06-13 17:05:12
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