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xuepiaofei

金虫 (小有名气)

[交流] 求助!水中藻类含量的测定方法?【有效期至2008年8月31号】

各位高手,我近期欲做原水除藻实验,不知道如何测定水中藻类的含量,请各位高手不吝赐教,最好有详细的实验方法,谢谢!

[ Last edited by xuepiaofei on 2008-8-19 at 10:52 ]

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ysqlym

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
xuepiaofei(金币+5,VIP+0):多谢!
一般用测定叶绿素a来表示藻类的含量(分光光度法)

一、材料用具及仪器药品

菠菜叶片、721分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量瓶(25ml)、漏斗、滤纸、乙醇(95%)



二、原理

叶绿素a、b在波长方面的最大吸收峰位于665nm和649nm,同时在该波长时叶绿素a、b的比吸收系数K为已知,我们即可以根据Lambert Beer定律,列出浓度C与光密度D之间的关系式:

D665=83.31Ca+18.60Cb…………………………….(1)

D649=24.54Ca+44.24 Cb…………………………….(2)

(1)(2)式中的D665、D649为叶绿素溶液在波长665nm和649nm时的光密度。

为叶绿素a、b的浓度、单位为每升克数。

82.04、9.27为叶绿素a、b在、在波长665nm时的比吸收系数。

16.75、45.6为叶绿素a、b在、在波长649nm时的比吸收系数。

解方程式(1)(2),则得 :

CA=13.7 D665—5.76 D649………………………(3)

CB=25.8 D649—7.6 D665……………………… (4)

G=CA+CB=6.10 D665+20.04 D649………(5)

此时,G为总叶绿素浓度,CA、CB为叶绿素a、b浓度,单位为每升毫克,利用上面(3)(4)(5)式,即可以计算叶绿素a、b及总叶绿素的总含量。



三、方法步骤

1.称取0.1克新鲜叶片,剪碎,放在研钵中,加入乙醇10ml共研磨成匀浆,再加5ml乙醇,过滤,最后将滤液用乙醇定容到25ml。

2.取一光径为1cm的比色杯,注入上述的叶绿素乙醇溶液,另加乙醇注入另一同样规格的比色杯中,作为对照,在721分光光度计下分别以665nm和649nm波长测出该色素液的光密度。

计算结果:

叶绿素a含量(mg/g. FW)=
叶绿素b含量(mg/g.FW)=
叶绿素总量(mg/g.FW)= 见链接
http://sky.scnu.edu.cn/jpkc/zwslx/fenye/jakj/li/shi-yan/14.htm
3楼2008-08-19 12:28:17
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ysqlym

金虫 (正式写手)

可以参考一下《水和废水监测分析方法》(第四版)649页之后的几段。
也可以参考一下这篇文章《HPLC测定饮用水中藻类叶绿素含量》
2楼2008-08-19 12:26:13
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yans

木虫 (正式写手)

网上baidu收索一下,有具体的讲解!
5楼2008-08-20 09:56:50
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chengy79

银虫 (小有名气)

参照<水和废水监测分析方法>第四版,叶绿素a可以用改进方法做,没必要研磨,可以用浸泡方法
宝宝健康成长,工作顺利
6楼2008-08-20 10:37:38
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