24小时热门版块排行榜    

查看: 2732  |  回复: 38
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

黑色的字

铁虫 (著名写手)

[求助] HPLC 反向C18柱,倒过来洗,柱压不降反升高了很多,什么情况? 已有14人参与

最近在用HPLC 反向C18柱分离一些芳香类化合物,柱子是完全新的,用了两天,柱压从87升到了121, 并且柱效也很差了(不论注射进去什么,总是在高极性60%-80%乙腈时才出来),我想是因为我的化合物跟柱子有很强的作用。于是,我决定把柱子倒过来洗,先用的50%乙腈-50%水,又用了100%甲醇,但两次洗完柱压不降反升高了很多。我都是返回到99%水-1%乙腈来测具体的柱压,然后作比较的。这种情况已经发生了好几次了。前边已经搞坏两根柱子了。不知道有没有人遇到过相同情况,也还请高手能够指点一二。真的,这是个新柱子,老板估计杀我的心都有了。
回复此楼
加油
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

R2BBr

木虫 (知名作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
C18反相柱是專門抓高极性物質,像是蛋白質与核醣核酸,沖提液是由高极性的水降低到低极性的甲醇乙睛丙酮。洗柱可以用到二氯甲烷,只要能把油脂溶化洗下都可以考慮。當然最後還是得逐?u洗回水柤,不然吸飽二氯甲烷的C18柱是沒有解析度的。

硅膠正相柱是專門抓低极性物質,像是油脂与

[ 发自小木虫客户端 ]
28楼2015-08-19 00:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 39 个回答

TrickyVick

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+1 2015-08-17 13:38:02
黑色的字: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-08-17 15:37:11
芳香类的甲醇里不溶吧?析出了?

换极性更小的冲,比如tetrahydrofuran一类的,前提是LC能用

你跑gradient也要考虑溶解性啊,你化合物整个gradient都不溶根本不能跑啊。我跑这些都要加5%的THF的。。。
2楼2015-08-17 04:02:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

TrickyVick

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
黑色的字: 金币+10, ★★★很有帮助, 恩,谢谢 2015-08-17 15:36:42
另外,都成这样了柱子多多少少都有点损伤了,不过应该不大

你以后跑新东西先用老柱子试
3楼2015-08-17 04:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
黑色的字: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-08-17 15:40:15
你那什么柱子啊,居然用1%的乙腈,一般的柱子根本受不了这么高的水相,柱子不坏才怪
5楼2015-08-17 10:27:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +8 晴天加油 2026-08-26 9/450 2026-08-27 14:14 by gltch
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +6 苏东坡二世 2026-08-23 6/300 2026-08-27 13:57 by zhangjianl
[基金申请] 青基如何破局 +3 lyz123lyz 2026-08-27 4/200 2026-08-27 13:08 by kulium
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +4 zhaosm1982 2026-08-27 5/250 2026-08-27 12:17 by zhaosm1982
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 17/850 2026-08-27 08:20 by 大萍1987
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见