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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 大肠杆菌菌液OD值与对数期
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[求助] 大肠杆菌菌液OD值与对数期

最近在用LB培养基培养E.coli 菌，需要用对数期的E.coli做实验，在培养的过程中是通过测定菌液OD值来推测E.coli处在哪个生长阶段的。想请问，假如取100微升菌液加入到96孔板中，OD值多少才能说明E.coli处于对数期。
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1楼 2015-08-15 13:51:01
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园园许

新虫 (初入文坛)
一般情况下我们认为OD为0.5-0.6之间为其生长对数期。做实验之前，可以测一下，是老手的话，通常都能看出来，也可以根据经验，培养时间也能确定。
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wuhao4850103
高兴是一天，苦恼也是一天，何以？
2楼2015-08-16 17:12:17
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 园园许 at 2015-08-16 17:12:17
一般情况下我们认为OD为0.5-0.6之间为其生长对数期。做实验之前，可以测一下，是老手的话，通常都能看出来，也可以根据经验，培养时间也能确定。

用96孔板测OD时，因为OD值跟加入的菌液量有关，加入的菌液量越大，OD值就越大。上面指的是加入100微升的时候OD值为0.5-0.6说明在对数期吗？
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3楼2015-08-17 11:54:44
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 园园许 at 2015-08-16 17:12:17
一般情况下我们认为OD为0.5-0.6之间为其生长对数期。做实验之前，可以测一下，是老手的话，通常都能看出来，也可以根据经验，培养时间也能确定。

4楼2015-08-17 11:56:44
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smilingworld

新虫 (小有名气)
大肠杆菌生长很快，楼主可以先做一个预备实验（preliminary experiment），在这个实验中，起始OD数值比如0.1或者0.05，然后基本上18到24个小时以后就可以绘制出完整的菌生长曲线，从迟缓期到稳定期，然后等着做相关实验时，比如加入到96孔板中，用同样的初始OD（与预备实验相同的），然后取与所测定的生长曲线中的对数期的数值相同或者大体相同的实验菌液的OD数值，基本上就是对数期的菌液了，如果不放心此回的生长曲线跟预备实验是否相同，同样可以再测一回菌的生长
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5楼2015-08-18 15:04:48
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by smilingworld at 2015-08-18 15:04:48
大肠杆菌生长很快，楼主可以先做一个预备实验（preliminary experiment），在这个实验中，起始OD数值比如0.1或者0.05，然后基本上18到24个小时以后就可以绘制出完整的菌生长曲线，从迟缓期到稳定期，然后等着做相关 ...

多谢多谢，太感谢了。
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6楼2015-08-18 17:08:27
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园园许

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2015-08-17 11:54:44
用96孔板测OD时，因为OD值跟加入的菌液量有关，加入的菌液量越大，OD值就越大。上面指的是加入100微升的时候OD值为0.5-0.6说明在对数期吗？...

我不清楚96孔板怎么测OD。但是你培养的菌液，摇晃均匀的情况下，整个都是相同的OD的，怎么可能存在“加入的菌液量越大，OD值就越大”的问题呢，OD是和体积没关系的
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高兴是一天，苦恼也是一天，何以？
7楼2015-08-19 17:17:26
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