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lx76707

新虫 (初入文坛)

[交流] 感受态细胞转化效率低的原因是什么？

做了超级感受态，但得到的转化率只有104左右，请问各位高人，超级感受态得到的转化效率低的问题出在哪里的呢？
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1楼 2008-08-18 14:02:40
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yyx1121

金虫 (正式写手)
这位虫子好

我也正在做转化，想请教你一些问题

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=927138&fpage=1
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努力过好每天。
2楼2008-08-18 14:10:28
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
xyklmu(金币+4,VIP+0):感谢答复，积极交流奖
一，菌液OD值 偏大或偏小
二，原始菌株不好
三，试剂超纯程度不够
四，操作时，对菌体伤害过大
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3楼2008-08-18 17:00:49
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liuyan6817

楼上的有道理。

跟你后续操作 都有关系。
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4楼2008-08-18 17:02:29
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流奖
影响感受态效率的其实就一条：状态
生长时控制OD就是为了达到对数期，此时菌活力最高
而处理时要使这种好的状态保持，但CaCl2处理又要使之处理充分，使膜局部变化达到最佳的感受状态
从这个意义上说，任何可能影响菌状态的步骤或试剂均有可能最终影响到感受效率

比如离心力是否太大导致菌破碎
CaCl2的纯度浓度处理时间……
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2008-08-18 18:00:36
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