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【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 yyx1121 的 11 个金币

yyx1121

金虫 (正式写手)

[交流] 转化时为什么出现两种菌落,一种长得很快(很少),一种很慢,但密密麻麻的!

最近我在做构建文库的实验,可是转化了几次,都出现这样的情况:

板中有些菌落长得很快,但是很少,零散分布在板中

等到上面的那些菌落长得差不多的时候,慢慢又出现了无法计数的小的菌落,这些菌落很小,而且非常密集,特别还有就是集中于板中的某一块,我猜测也许是铺板时候出现的一些问题,那么如何避免呢?

另外,我把那些小菌落划具有抗性的板,明显看出具有抗性

请高手帮我解答一下,这是怎么回事呢?非常感谢!
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努力过好每天。
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biogefart

木虫 (著名写手)

如果是amp抗性,学生该打!

★ ★ ★ ★
yyx1121(金币+1,VIP+0):先谢谢回复!是amp抗性,这些密密麻麻的菌落可以长得比较大,但是绝对不是卫星菌落!时间长了,那些零散的大菌落周围确实出现有卫星菌落。但是密密麻麻的这些应该不是的,而且我挑这些密密麻麻的菌落划板,明显有amp抗性!
yyx1121(金币+1,VIP+0):补充一下,密密麻麻的这些菌落是比较均匀的,但是仅仅是在平板的某一大块地方!这些菌落长得时间比较久,且在其他的零散的大菌落都长出卫星菌落了之后才长得比较好!
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流奖
这是amp抗性质粒特有的卫星菌落,就是又抗性的E col分泌beta内酰胺酶分解周围的amp,从而使没有抗性的e coli生长。
闹太套
2楼2008-08-18 12:07:22
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yyx1121

金虫 (正式写手)


xyklmu(金币+1,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by biogefart at 2008-8-18 12:07:
这是amp抗性质粒特有的卫星菌落,就是又抗性的E col分泌beta内酰胺酶分解周围的amp,从而使没有抗性的e coli生长。

先谢谢回复!是amp抗性,这些密密麻麻的菌落可以长得比较大,但是绝对不是卫星菌落!时间长了,那些零散的大菌落周围确实出现有卫星菌落。但是密密麻麻的这些应该不是的,而且我挑这些密密麻麻的菌落划板,明显有amp抗性!
努力过好每天。
3楼2008-08-18 13:55:23
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yyx1121

金虫 (正式写手)


xyklmu(金币+1,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by biogefart at 2008-8-18 12:07:
这是amp抗性质粒特有的卫星菌落,就是又抗性的E col分泌beta内酰胺酶分解周围的amp,从而使没有抗性的e coli生长。

补充一下,密密麻麻的这些菌落是比较均匀的,但是仅仅是在平板的某一大块地方!这些菌落长得时间比较久,且在其他的零散的大菌落都长出卫星菌落了之后才长得比较好!
努力过好每天。
4楼2008-08-18 13:58:28
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biogefart

木虫 (著名写手)

如果不是卫星菌落。。。。。。


yyx1121(金币+1,VIP+0):污染了也不至于长这么多克隆出来哦,呵呵.再说了,我涂了很多的板,有的只长几个个菌落出来,其他什么也没有
十有八九污染了枯草杆菌或者其他阳性菌了,提个质粒看看有没有东西。
闹太套
5楼2008-08-18 15:57:14
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


yyx1121(金币+1,VIP+0):不至于吧,同时做的感受态,其他的都没有污染哦,第二次转化的只有几个大的克隆,其他什么也没有!
估计你做感受态的时候污染了
6楼2008-08-18 16:53:38
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yyx1121

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by biogefart at 2008-8-18 15:57:
十有八九污染了枯草杆菌或者其他阳性菌了,提个质粒看看有没有东西。

污染了也不至于长这么多克隆出来哦,呵呵

再说了,我涂了很多的板,有的只长一个菌落出来,其他什么也没有
努力过好每天。
7楼2008-08-18 16:54:57
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biogefart

木虫 (著名写手)

提质粒先。

8楼2008-08-18 17:03:48
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liuyan6817

菌检结果怎么样?

可能你的连接有问题
9楼2008-08-18 17:04:03
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
小菌落做PCR检测一下,看看有没有插入片段。如果有,与大菌落的插入片段有没有区别?
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
10楼2008-08-19 19:29:56
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