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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 做过平板涂布法的进来看看
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beach2015

新虫 (小有名气)

[求助] 做过平板涂布法的进来看看 已有13人参与

涂布法中的稀释过程用到的移液管、装稀释液的试管和移液器吸嘴该怎么消毒或者灭菌？还有稀释液是用无菌水好还是无菌生理盐水好？涂布后的结果，稀释10的6次方的板上长了70多菌落，而稀释10的7只有几个或者没有菌落，正常吗？涂布是涂了100微升的。

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1楼 2015-08-13 15:16:00
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
稀释用试管就正常灭菌就行了，吸嘴可以加塞点棉花；
无菌水和生理盐水都可以，不嫌麻烦就生理盐水
10-6和10-7菌落个数应该还算不错的
如果是分离单菌落就无所谓了，如果是计数的话，建议查询微生物菌落计数原则进行计数。
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2楼2015-08-13 17:11:53
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普通回帖

beach2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2015-08-13 17:11:53
稀释用试管就正常灭菌就行了，吸嘴可以加塞点棉花；
无菌水和生理盐水都可以，不嫌麻烦就生理盐水
10-6和10-7菌落个数应该还算不错的
如果是分离单菌落就无所谓了，如果是计数的话，建议查询微生物菌落计数原则进 ...

稀释用的试管灭菌也要用牛皮纸包住吗？吸嘴用棉花怎么塞？

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3楼2015-08-14 09:15:03
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by beach2015 at 2015-08-14 09:15:03
稀释用的试管灭菌也要用牛皮纸包住吗？吸嘴用棉花怎么塞？
...

是的，不放心可以用纱布包一下再包一层牛皮纸，吸嘴的话就用棉花塞进就行了，具体怎么塞呢？？？？用尖尖的东西顶顶就塞进去了~
不需要太紧，差不多就行了。
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4楼2015-08-14 10:04:04
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棘白菌素

铜虫 (正式写手)
是我没明白你吸嘴的意思，吸嘴可以不灭菌，吹打一些75酒精，在超净台照照就差不多了，你移液器顶端加塞棉花，再用吸嘴吸就好了。
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5楼2015-08-14 10:07:41
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beach2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 棘白菌素 at 2015-08-14 10:07:41
是我没明白你吸嘴的意思，吸嘴可以不灭菌，吹打一些75酒精，在超净台照照就差不多了，你移液器顶端加塞棉花，再用吸嘴吸就好了。

好的，谢谢了！

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6楼2015-08-14 19:44:41
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ToContinue_

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般不是用121℃30分钟高压灭菌吗

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7楼2015-08-16 08:54:10
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发酵流程卡

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用移液枪试试（枪头，121℃，30min),稀释液最好用无菌水配，涂布用量一般是按照培养皿的大小而定，常规状态下涂20~50mL就可以了。
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做最真实的自己
8楼2015-08-16 10:15:29
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beach2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ToContinue_ at 2015-08-16 08:54:10
一般不是用121℃30分钟高压灭菌吗

我都是20分钟的。

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9楼2015-08-16 13:06:21
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beach2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 发酵流程卡 at 2015-08-16 10:15:29
可以用移液枪试试（枪头，121℃，30min),稀释液最好用无菌水配，涂布用量一般是按照培养皿的大小而定，常规状态下涂20~50mL就可以了。

枪头不是塑料的吗？121度会不会熔点

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10楼2015-08-16 13:07:41
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