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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 谁做过细菌培养液和细菌总蛋白的SDS—PAGE呢？
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小科cau

木虫 (正式写手)

[求助] 谁做过细菌培养液和细菌总蛋白的SDS—PAGE呢？ 已有3人参与

谁做过细菌培养液上清和细菌总蛋白的SDS—PAGE呢？为什么我跑出来的，培养上清条带混成一团，而菌体蛋白只有一条，新人报道，请多多指教！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-08-13 04:21:11
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要跑2d的。一维的就是这样

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2楼2015-08-13 07:32:08
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌体蛋白跑胶应该也是有很多条带的，我们每次扩大培养前都会跑的。培养液上清还真没跑过
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3楼2015-08-13 08:46:24
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不太明白你的意思啊。。。你做的是大肠杆菌蛋白表达么？
你是说你的细菌培养液上清是直接从培养液培养液中提取的，还是进行离心后提取的上清？
菌体蛋白只有一条，是一条粗的横条带，还是竖着的条带？
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
4楼2015-08-13 11:18:24
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小科cau

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-08-13 11:18:24
不太明白你的意思啊。。。你做的是大肠杆菌蛋白表达么？
你是说你的细菌培养液上清是直接从培养液培养液中提取的，还是进行离心后提取的上清？
菌体蛋白只有一条，是一条粗的横条带，还是竖着的条带？...

培养液离心上清和菌体沉淀分别跑电泳。一条很粗的横条带，这是怎么回事呢？今天我改了一下稀释倍数，效果还是不好，上清跑出来的条带很淡，菌体沉淀隐约出现一个条带，请前辈指教！
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5楼2015-08-13 18:55:54
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小科cau

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a86052 at 2015-08-13 08:46:24
菌体蛋白跑胶应该也是有很多条带的，我们每次扩大培养前都会跑的。培养液上清还真没跑过

我跑的是支原体蛋白，为啥跑不出来呢
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6楼2015-08-13 18:57:36
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博学善思

新虫 (小有名气)
可能是菌体的量不够吧，或者你可以超声破胞后在取上清和沉淀分别跑电泳，再看看

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新浪微博：博学善思work
7楼2015-08-14 10:07:55
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