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小科cau

木虫 (正式写手)

[求助] 谁做过细菌培养液和细菌总蛋白的SDS—PAGE呢? 已有3人参与

谁做过细菌培养液上清和细菌总蛋白的SDS—PAGE呢?为什么我跑出来的,培养上清条带混成一团,而菌体蛋白只有一条,新人报道,请多多指教!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要跑2d的。一维的就是这样

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-13 07:32:08
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌体蛋白跑胶应该也是有很多条带的,我们每次扩大培养前都会跑的。培养液上清还真没跑过
3楼2015-08-13 08:46:24
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不太明白你的意思啊。。。你做的是大肠杆菌蛋白表达么?
你是说你的细菌培养液上清是直接从培养液培养液中提取的,还是进行离心后提取的上清?
菌体蛋白只有一条,是一条粗的横条带,还是竖着的条带?
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
4楼2015-08-13 11:18:24
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小科cau

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-08-13 11:18:24
不太明白你的意思啊。。。你做的是大肠杆菌蛋白表达么?
你是说你的细菌培养液上清是直接从培养液培养液中提取的,还是进行离心后提取的上清?
菌体蛋白只有一条,是一条粗的横条带,还是竖着的条带?...

培养液离心上清和菌体沉淀分别跑电泳。一条很粗的横条带,这是怎么回事呢?今天我改了一下稀释倍数,效果还是不好,上清跑出来的条带很淡,菌体沉淀隐约出现一个条带,请前辈指教!
5楼2015-08-13 18:55:54
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小科cau

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by a86052 at 2015-08-13 08:46:24
菌体蛋白跑胶应该也是有很多条带的,我们每次扩大培养前都会跑的。培养液上清还真没跑过

我跑的是支原体蛋白,为啥跑不出来呢
6楼2015-08-13 18:57:36
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博学善思

新虫 (小有名气)

可能是菌体的量不够吧,或者你可以超声破胞后在取上清和沉淀分别跑电泳,再看看

[ 发自小木虫客户端 ]
新浪微博:博学善思work
7楼2015-08-14 10:07:55
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