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star97lx

新虫 (小有名气)

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[交流] 关于NF-KB p65做的western blot结果

不知道大家在用wb检测细胞核蛋白NF-KB，用的p65抗体的时候有没有遇到这种情况，本来应该是65KD大小的条带，曝光出来却是一百多。NF-KB应该是一个二聚体，一百多KD是不是就是因为二聚体没有打开？按理来说是不是蛋白质变性后二聚体就打开了？我是用PCR仪直接95℃5min变性的，这中间有什么问题吗？希望有大神或者懂的人能不吝赐教，着实有一点想不通。谢谢啦~

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1楼 2015-08-06 07:43:06

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star97lx

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引用回帖:

19楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-06 10:23:54
理论上可能是二聚体没有打开，但这也不是唯一的解释，你那个一百多的条带有可能是杂带，这样的话可能的原因就更多了。我平常做WB，样品加入loading buffer后再沸水里煮5分钟

我一共分了6个组，曝光都只有这一条带且在同一水平，整张片子也只有这一条带，这样看来是不是二聚体的可能性要大一点呢？