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代琦DQ

银虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取 已有4人参与

请教各位大神为什么我提取的组织DNA的260/230的值远大于2?是260/230不是260/280,是远大于2不是小于2!!!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
代琦DQ: 金币+1 2015-08-06 12:11:25
大于2是正常的,远大于2,说明样品中酚类、多糖等杂质去除的很干净。因为这些物质在230处有吸收峰。
2楼2015-08-06 12:01:31
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普通回帖

代琦DQ

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 12:01:31
大于2是正常的,远大于2,说明样品中酚类、多糖等杂质去除的很干净。因为这些物质在230处有吸收峰。

谢谢你的回复,但我的260/280达到二十多也正常么?还有就是有的出现负值是神马情况

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-06 12:13:01
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LHByes

金虫 (正式写手)

同问

[ 发自小木虫客户端 ]
加油!
4楼2015-08-06 12:17:55
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 代琦DQ at 2015-08-06 12:13:01
谢谢你的回复,但我的260/280达到二十多也正常么?还有就是有的出现负值是神马情况
...

260/280二十多?你确定没写错?260/230吧。刚又查了下,260/230太大的确不正常,还是考虑有杂质未除尽。出现负值一般认为是样品稀释过度引起的。可以自己用260/230或260/280做关键词百度下,网上有更详细解释。
5楼2015-08-06 12:49:27
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代琦DQ

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-06 12:49:27
260/280二十多?你确定没写错?260/230吧。刚又查了下,260/230太大的确不正常,还是考虑有杂质未除尽。出现负值一般认为是样品稀释过度引起的。可以自己用260/230或260/280做关键词百度下,网上有更详细解释。...

抱歉, 是260/230,我百度过了,没有满意的答案

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-08-06 13:03:00
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 代琦DQ at 2015-08-06 13:03:00
抱歉, 是260/230,我百度过了,没有满意的答案
...

如果260/280值正常,浓度值正常,而260/230比值偏大可不用太在意,一般不会太影响后续酶切、PCR等实验。
7楼2015-08-06 13:23:03
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vivd娟

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果260/280值正常,纯DNA1.8,一般介于1.8和2.0之间,而260/230比值偏大点可不用太在意,我直接进行后续的pcr实验了。
8楼2015-08-06 14:05:30
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
代琦DQ: 金币+1, 虽然没用,但还是要谢谢回复! 2015-08-08 17:41:51
A230nm是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长,比值可进行核酸样品纯度评估:纯DNA和 RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0标明样品被碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂污染,需要纯化样品。A230产生负值主要是由于在很低DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中,需要降低样品的稀释度,A230的负值会被校正。
网上找到的,希望对你有帮助~
9楼2015-08-07 15:17:39
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

太高了考虑核酸降解了吧
核酸提取与Taqman诊断
10楼2020-05-15 14:25:12
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