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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 聚丙烯酰胺电泳问题
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xiaoche

铜虫 (小有名气)

[交流] 聚丙烯酰胺电泳问题

最近不知道为什么跑的电泳图总是有严重的拖尾现象，我跑的是8%的聚丙烯酰胺，做的是SSR基因定位，图片在附件，请大家帮忙分析一下，急用，谢谢。
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1楼 2008-08-14 16:31:30
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
温度太高降解？
配胶以及电泳的buffer不新鲜？（出现沉淀绝对不能用）
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2楼2008-08-14 18:30:31
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
最好能跑下marker看看，到底是样品的问题还是真的是胶以及buffer的问题
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3楼2008-08-14 18:30:57
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
考虑溶解DNA的溶解液是否有外源核酸酶的污染
如果不确定哪步出了问题，建议把所有要用到的试剂重新配制或高压灭菌

从胶本身分析，感觉有部分样品未进入到孔中，可以考虑是否胶在配制过程中是否存在PH变化的问题，导致与buffer之间缓冲系统不匹配
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4楼2008-08-14 19:37:51
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xiaoche

铜虫 (小有名气)
谢谢楼上各位的回复，我再根据楼上各位的建议重新试一下。
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5楼2008-08-14 20:20:26
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ypan

木虫 (著名写手)
补充一点，实验小窍门：
电泳的时候电压可以小一些，电泳的时间可以长一点，这样可以消除一些不必要的拖尾现象！
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6楼2008-08-14 21:25:10
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